產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬瘟病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P63674
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見使用方法）。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對(duì)照），一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照，并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）

錫標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體: 10%HCl) Tin standard 7440-31-5 質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL,基體: 10%HCl

 冰凍切片組織ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

溴酚藍(lán)鈉鹽 Bromophenol blue, sodium salt 62625-28-9 質(zhì)量規(guī)格：BS Grade

96孔板細(xì)胞基因組DNA分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

組織JNK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

白頭翁皂苷B Pulchinenoside B 135247-95-9 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

D 13223-d4 (氟吡汀代謝產(chǎn)物)  D 13223-d4 (Flupirtine Metabolite)  1216989-17-1 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

(S)-(-)-氨魯米特 (S)-(-)-Aminoglutethimide 57288-03-6 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

鹽酸氨溴索 Ambroxol HCl 23828-92-4 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Fmoc-3-苯甲酰-赤-鞘氨醇 Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine 676485-58-8 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

奧司他韋酸-d3  Oseltamivir-d3 Acid 187227-45-8 (unlabeled) 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

8-羥基甲氨蝶呤-d3 7-Hydroxy Methotrexate-d3 432545-62-5 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

碳酸鈣（標(biāo)準(zhǔn)品） Calcium carbonate 471-34-1 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

血液5－焦磷酸甲戊二羥酸脫羧酶（mevalonate 5-pyrophosphate decarboxylase）活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性生物發(fā)光法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

蘭索拉唑（標(biāo)準(zhǔn)品） Lansoprazole  103577-45-3 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

豬瘟病毒PCR檢測試劑盒動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基（A法） 英文名稱：Power - nitrate medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于蠟樣芽孢桿動(dòng)力試驗(yàn)用途:用于細(xì)的動(dòng)力試驗(yàn)和硝酸鹽還原試驗(yàn)成分(g/L)蛋白胨 5.0牛肉浸粉 3.0硝 1.0瓊脂 4.0pH值7.0 25℃用法稱取本品 13.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管,每管 10ml,121℃高壓滅 15min,備用。

木糖-明膠培養(yǎng)基 英文名稱：Xylose - gelatin medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于蠟樣芽孢桿明膠液化試驗(yàn)產(chǎn)品用途：用于蠟樣芽孢桿明膠液化試驗(yàn)產(chǎn)品用法：稱取本品15.5克，加熱溶解于100ml蒸餾水中，分裝試管，115℃高壓滅15min，迅速冷卻，備用。質(zhì)量控制與典型特征：蠟樣芽孢桿典型特征為不發(fā)酵木糖，培養(yǎng)基顏色不變，液化明膠。

蠟樣芽孢桿選擇瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱：Bacilus Cereus Selective Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于蠟樣芽孢桿選擇性分離培養(yǎng)用途：用于蠟樣芽胞桿的選擇性分離培養(yǎng)成分（g/L）胰酪蛋白胨 10.0牛肉浸粉 1.0D-甘露醇 10.0氯鈉 10.0紅 0.025瓊脂 12.0PH值 7.2±0.2 25℃用法：稱取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝每瓶100ml,121℃高壓滅15分鐘，冷至50℃左右時(shí)，每瓶加入10ml 50%的無卵黃乳液和多粘素B 10000IU混勻，傾入無平皿，備用。

葡萄糖酪胨瓊脂 英文名稱：Dextrose Casein-peptone Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于食品中臘樣芽孢桿鑒定和計(jì)數(shù)（APHA方法）用途:用于食品中芽孢桿的鑒定和計(jì)數(shù)(APHA方法)。成分(g/L)酪蛋白胨 10.0葡萄糖 5.0溴紫 0.04瓊脂 12.0pH值6.8 ± 0.2 25℃用法稱取本品 27g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用

多粘素B（1萬單位） 英文名稱：Polymyxin B 產(chǎn)品規(guī)格：1萬單位*5支 產(chǎn)品用途：添加于100mlHB0249或HB0280或HB0248-1或HB0248中每支添加于100ml甘露醇卵黃多粘素瓊脂基礎(chǔ)（MYP）或改良MYP中或100ml蠟樣芽孢桿選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)或100ml胰酪胨大豆多粘素肉湯基礎(chǔ)（SN）中

溶酶肉湯基礎(chǔ) 英文名稱：Lysozyme Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于蠟樣芽孢桿的溶酶試驗(yàn)用途:用于蠟樣芽孢桿的溶酶試驗(yàn)。成分(g/L)牛肉浸粉 3.0蛋白胨 5.0pH值6.8 ± 0.1 25℃用法稱取本品 8.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝于燒瓶中,每瓶 99ml,121℃高壓滅 15 分鐘,冷至50℃左右時(shí),每瓶中加入0.1% 溶酶溶液 1ml,混勻后分裝無試管,每管 2.5ml, 備用。注：溶酶溶液制備：在 65ml 滅的 0.1mol/L鹽酸中加入 0.1g 溶酶,煮沸 20 分鐘溶解后,再用滅 0.1mol/L 鹽酸稀釋至 100ml。

多粘素B（2.25萬單位） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：2.25萬單位*5支 產(chǎn)品用途：每支添加于225ml胰酪胨大豆多粘素肉湯基礎(chǔ)中與培養(yǎng)基配套使用，每支添加于225ml胰酪胨大豆多粘素肉湯基礎(chǔ)中含225mL胰酪胨大豆多粘素肉湯均質(zhì)袋