本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬流行性腹瀉病毒PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P63676
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見使用方法）。

產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品） Liensinine 2586-96-1 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

細(xì)胞氯霉素乙?；D(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

一步法平端PCR反應(yīng)液 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

磷脂酰絲氨酸PS（phosphatidylserine）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶2A6（COUMARIN）活性高效液相色譜法（HPLC）定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

 細(xì)胞NF KAPPA B P50蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

環(huán)胞甙鹽酸鹽；鹽酸環(huán)胞苷；安西他濱鹽酸鹽 Cyclocytidine 10212-25-6 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

酵母SD-LEU培養(yǎng)基 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：100毫升

L-纈氨酰胺鹽酸鹽 L-Valinamide hydrochloride  3014-80-0 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大觀霉素（標(biāo)準(zhǔn)品） spectinomycin 1695-77-8 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定

線蟲果蠅轉(zhuǎn)座子Mos1熱休克誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

非洛地平/非氯地平 Felodipine 72509-76-3 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP30,BR

磺溴酞鈉(>98%,BR) Sulfobromophthalein disodium salt hydrate 123359-42-2 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

通用型血液對(duì)氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織甲基化組蛋白H3-K9染色質(zhì)沉淀分析（CHIP）試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：10次

4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC)) 4'-Butoxyacetophenone 5736-89-0 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

豬流行性腹瀉病毒PCR檢測(cè)試劑盒多價(jià)蛋白胨-酵母膏（PY）培養(yǎng)基 英文名稱：Poly Peptone Yeast Extract Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭糖（醇）發(fā)酵的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。成分(g/L)多價(jià)胨 20.0酵母膏 5.0氯鈉 5.0pH值6.9 ± 0.1 25℃用法稱取本品 30.0g,并加入 10g糖或醇,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝到螺帽試管內(nèi),每管 9ml,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱：Cooked Meat Medium Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：加入牛肉粒,用于肉毒梭及厭氧梭狀芽孢桿的檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))用途:用于厭氧的增培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 30.0牛肉浸粉 3.0酵母浸粉 5.0可溶性淀粉 2.0葡萄糖 3.0磷酸二氫鈉 5.0pH值7.0 - 7.4 25℃用法稱取本品 48.0g,加入 1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸 1 分鐘。取碎肉渣分裝 15mm×150mm 試管約 2-3cm高,將上述液體培養(yǎng)基分裝至每管內(nèi)超過肉渣表面約 1cm。121℃高壓滅 15 分鐘備用。質(zhì)量控制和典型特征36±1℃培養(yǎng) 24-72 小時(shí),待出現(xiàn)生長(zhǎng)特征(培養(yǎng)液渾濁、產(chǎn)氣、出現(xiàn)異味)后進(jìn)行鏡檢和接種到分離培養(yǎng)基中(如鐵瓊脂)。反之,則報(bào)告陰性。

皰肉牛肉粒 英文名稱：Dried Meat Particle 產(chǎn)品規(guī)格：100g 產(chǎn)品用途：加入皰肉基礎(chǔ)中，配成皰肉培養(yǎng)基加入皰肉基礎(chǔ)中，配成皰肉培養(yǎng)基

液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 英文名稱：Thiolglycollate Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭確證試驗(yàn)的細(xì)培養(yǎng)(GB.SN標(biāo)準(zhǔn))用途:用于藥品、生物制品無檢測(cè),檢測(cè)好氧和厭氧。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸鈉 0.5L-胱氨酸 0.5氯鈉 2.5刃天青 0.001瓊脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法稱取本品 29.25g,加熱攪拌溶解于 1000ml 純化水中,分裝適宜容器 ,其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合,培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層 ( 粉紅色 ) 不超過培養(yǎng)基深度的 1/2 。121℃高壓滅 15 分鐘迅速冷卻。在供試品接種前,培養(yǎng)基氧化層高度不得超過培養(yǎng)基深度的 1/5 。否則,須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失( 不得超過 20 分鐘 ),迅速冷卻 ,只限加熱一次,并應(yīng)防止被污染。

卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱：Egg Yolk Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于肉毒梭、產(chǎn)氣莢膜梭的分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）用途:用于肉毒梭、產(chǎn)氣莢膜梭的分離培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0氯鈉 5.0瓊脂 15.0葡萄糖 10.0pH值7.5 ± 0.1 25℃用法稱取本品 48.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘 ,冷至 50℃左右時(shí),加入 50% 卵黃乳液100ml,搖勻,傾入無平皿。

動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基 英文名稱：Power - nitrate medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭的動(dòng)力試驗(yàn)用途：于產(chǎn)氣莢膜梭的檢測(cè)。成分（g/L）蛋白胨 5.0g牛肉粉 3.0g硝 1.0g瓊脂 3.0gPH值 6.9-7.1用 法稱取本品 12.0 克，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝后，121℃高壓滅15分鐘備用。

含鐵牛奶培養(yǎng)基 英文名稱：Iron milk medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭的牛奶發(fā)酵試驗(yàn)用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭的牛奶發(fā)酵試驗(yàn)。成分(g/L)全脂奶粉 100.0硫酸亞鐵 1.0用法稱取本品 101.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管,116 ℃高壓滅 10 分鐘,備用。

梭鑒別瓊脂（DCA） 英文名稱：Differentia Clostridial Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于干燥食品鹽還原梭的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)用途:用于干燥食品中鹽還原梭的計(jì)數(shù)。用法稱取本品 43.25g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。