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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:新城疫病毒PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P63710
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
新城疫病毒PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:新城疫病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P63710
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

檸檬酸三銨 Ammonium citrate, tribasic 3458-72-8 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,AR

R-氯吡格雷羧酸 R-Clopidogrel Carboxylic Acid 324757-50-8 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

矮壯素(標(biāo)準(zhǔn)品)  (2-Chloroethyl)trimethylammonium chloride 999-81-5 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

2-(4-tert-丁苯基)嘧啶(>97.0%(GC)) 2-(4-tert-Butylphenyl)pyridine 524713-66-4 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)

苦玄參苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品) Picfeltarraenin IV 184288-35-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

組織NADPH細(xì)胞色素C還原酶(NADPH Cytochrome C Reductase)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

腸胃活檢螺旋桿(H. PYLORI)吉姆薩(GIEMSA)染色試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

石蠟切片組織線粒體復(fù)合物III蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

 細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

物理法冰凍切片抗原修復(fù)處理試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

Δ2-頭孢他啶 Δ2-Ceftazidime 217796-42-4 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

萊苞迪甙D(標(biāo)準(zhǔn)品) Rebaudioside D 63279-13-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95.50%,標(biāo)準(zhǔn)品

呋塞米(速尿) Furosemide 54-31-9 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

鹽酸氨溴索(標(biāo)準(zhǔn)品) Ambroxol HCl 23828-92-4 質(zhì)量規(guī)格:含量測定

鷹嘴豆芽素A(標(biāo)準(zhǔn)品) Biochanin A 491-80-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

金標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Gold standard 7440-57-5 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml

新城疫病毒PCR檢測試劑盒沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)(2015藥典) 英文名稱:Sabouraud Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于真檢測用途:用于真檢測。成分(g/L)動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 10.0葡萄糖 40.0瓊脂 15.0pH值 5.6±0.2 25 ℃用法稱取本品 65.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 純化水中,121℃高壓滅 15 分鐘,冷卻至 50℃左右時,傾入無平皿,備用 。

R2A瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:R2A Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于純化水中落總數(shù)的測定R2A瓊脂培養(yǎng)基用于純化水中落總數(shù)的測定,(EP、USP、Chp標(biāo)準(zhǔn))酵母浸出粉 0.5蛋白胨 0.5酪蛋白水解物 0.5葡萄糖 0.5可溶性淀粉 0.5磷酸氫二鉀 0.3無水硫酸鎂 0.024酸鈉 0.3瓊脂 15.0pH值7.2 ± 0.2 25℃調(diào)整PH值,使得R2A瓊脂滅后的PH值為7.2±0.2。使用高壓鍋,121°C下高壓滅15分鐘。不同藥典關(guān)于純化水的微生物檢測方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中國藥典【檢查】 微生物限度 取本品不少于 1ml,按薄膜過濾法處理后,采用 R2A 瓊脂培養(yǎng)基,30~35℃培養(yǎng)不少于 5 天,依法檢查(通則 1105),每1ml 供試品中需氧總數(shù)不得過 100cfu。操作簡述:除葡萄糖、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調(diào)節(jié) pH 值使加熱后在 25℃的 pH值為 7.2±0.2,加入瓊脂,加熱溶化后,再加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅。 R2A 瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查試驗 照通則 1105 中“計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查”的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查方法進行,試驗株為銅綠假單胞和枯草芽孢桿。應(yīng)符合規(guī)定。USP標(biāo)準(zhǔn)在美國藥典中,推薦使用0.45μm薄膜過濾法,并同時使用高營養(yǎng)培養(yǎng)基(平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(PCA))于30-35℃培養(yǎng)72小時以上,和低營養(yǎng)培養(yǎng)基(R2A瓊脂)于20-25℃培養(yǎng)96小時以上。檢測標(biāo)準(zhǔn)為:≤100cfu/ml 。操作簡述:(可根據(jù)實際情況調(diào)整)量取10ml充分混勻的水樣,以無操作加入安裝好的薄膜過濾器內(nèi),過濾。并用 pH7.0的無氯鈉-蛋白胨緩沖液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量為100ml,共沖洗1次。過濾后,取出濾膜,正面朝上貼于瓊脂平板上。共制備 2張濾膜,一張濾膜貼于平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板(高營養(yǎng)培養(yǎng)基)置30℃~35℃生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)2~3天,計數(shù)。另一張濾膜貼于R2A瓊脂平板(低營養(yǎng)培奍基),置20℃~25℃生化培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)5~7天,計數(shù)。以培養(yǎng)基平板上落數(shù)生長較多者作為檢測結(jié)果, 按比例折算為1ml純化水中的微生物數(shù)量后報告。

胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基(TSB)(2015藥典) 英文名稱:TSB 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)用途:一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)胰酪胨 17.0g 氯鈉 5.0g大豆木瓜蛋白酶消化物 3.0g 磷酸氫二鉀 2.5g葡萄糖(一水合/無水) 2.5g (2.3g)pH 7.3±0.2 25℃用法:稱取本品30.0g,加熱攪拌溶解于1000ml純化水中,分裝于試管或其他的容器中,121℃高壓滅15min,備用

硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(顆粒) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于藥品、生物制品無檢測,檢測好氧和厭氧用途:用于藥品、生物制品無檢測,檢測好氧和厭氧。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸鈉 0.5L-胱氨酸 0.5氯鈉 2.5刃天青 0.001瓊脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法稱取本品 29.25g,加熱攪拌溶解于 1000ml 純化水中,分裝適宜容器 ,其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合,培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層 ( 粉紅色 ) 不超過培養(yǎng)基深度的 1/2 。121℃高壓滅 15 分鐘迅速冷卻。在供試品接種前,培養(yǎng)基氧化層高度不得超過培養(yǎng)基深度的 1/5 。否則,須經(jīng)100℃水浴加熱至粉紅色消失( 不得超過 20 分鐘 ),迅速冷卻 ,只限加熱一次,并應(yīng)防止被污染。規(guī)格:250g有效期: 三年

磷酸鹽緩沖稀釋液(ph7.2) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9ml*20支 產(chǎn)品用途:用于樣品稀釋用于樣品稀釋

卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱:Egg-Yolk Salt Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于藥品,生物制品金黃色葡萄球選擇性分離用途:用于金黃色葡萄球的選擇性分離培養(yǎng)。成分(g/650ml)蛋白胨 6.0牛肉粉 1.8氯鈉 30.0瓊脂 14.0pH值7.6 ± 0.1 25℃用法稱取本品 51.8g,加入 650ml 蒸餾水中,121℃高壓滅15 分鐘,冷至 60℃左右時,以無操作加入 10% 氯鈉卵黃溶液 100ml,混勻,傾入無平皿。

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