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產品詳情
  • 產品名稱:人類**缺陷病毒1型(HIV-1)PCR檢測試劑盒

  • 產品型號:FS-P63718
  • 產品**:撫生
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簡單介紹:
人類**缺陷病毒1型(HIV-1)PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
詳情介紹:

實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

產品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:人類**缺陷病毒1型(HIV-1)PCR檢測試劑盒
產品規(guī)格:50T
產品貨號:FS-P63718
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

細胞黃嘌呤氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次

人體NK細胞分離試劑盒 進口/國產 規(guī)格:10次

沒食子兒茶素沒食子酸酯(標準品) GCG;(?)-Gallocatechin gallate 4233-96-9 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

人體組織N-乙酰轉移酶2(NAT2)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次

脫氫諾龍醋酸酯 Dehydronandrolon 2590-41-2 質量規(guī)格:>96%

阿立哌唑-d8 Aripiprazole-d8 1089115-06-9 質量規(guī)格:美國進口

茯苓酸(標準品) Pachymic acid 29070-92-6 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

外消旋順式鹽酸舍曲林 rac-cis-Sertraline Hydrochloride 79617-95-1 質量規(guī)格:美國進口

糞便傷寒沙門氏(Salmonella Typhi)定性基因檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次

熒光生物素穩(wěn)定/稀釋溶液 進口/國產 規(guī)格:10毫升

植物基因組DNA純化試劑盒(低多糖/酚) 進口/國產 規(guī)格:50次

 細胞PDGF-B蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:10/50 次

土貝母苷甲(標準品) Tubeimoside I 102040-03-9 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

鼠尾草酚(標準品) Carnosol 5957-80-2 質量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品

Zinc固著液 進口/國產 規(guī)格:50毫升

二氫-D-赤-鞘氨醇 Dihydro-D-erythro-Sphingosine 764-22-7 質量規(guī)格:美國進口

人類**缺陷病毒1型(HIV-1)PCR檢測試劑盒檢定培養(yǎng)基1號(低PH) 英文名稱:Antibiotic Agar No.1 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于磺芐青霉素效價測定用途:用于磺芐青霉素效價測定。成分(g/L)蛋白胨 5.0牛肉浸粉 3.0磷酸氫二鉀 3.0瓊脂 15.0pH值6.5- 6.6 25℃用法稱取本品 26.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,116℃高壓滅 20 分鐘,備用。

檢定培養(yǎng)基4號(PH6.5-6.6) 英文名稱:Antibiotic Agar No.4 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于鹽霉素鈉、莫能素及其制劑等效價測定用途:用于鹽霉素鈉、莫能素及其制劑等效價測定。成分(g/L)蛋白胨 3.0葡萄糖 1.0瓊脂 20.0酵母浸出物 3.0pH值6.5-6.6 25℃用法稱取本品27.0g,加熱溶解于 1000ml 純化水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

檢定培養(yǎng)基6號(7.8-8.0) 英文名稱:Antibiotic Agar No.6 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于粘素等的效價測定用途:用于粘素等的效價測定。成分(g/L)蛋白胨 8.0酵母粉 5.0牛肉粉 3.0氯鈉 45.0磷酸氫二鉀 3.3磷酸二氫鉀 1.0葡萄糖 2.5瓊脂 13.0pH值7.8 - 8.0 25℃用法稱取本品80.8g,加熱溶解于1000ml 純化水中,115℃高壓滅30分鐘,備用。

0.5%葡萄糖肉湯瓊脂 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于硫酸鏈霉素等的無檢查稱取本品38.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水,分裝,115~116℃高壓滅30min,備用。

HB四連式牛津杯 英文名稱: 產品規(guī)格:10個*15包/箱 產品用途:應用于藥敏試驗【產品名稱】通用名稱:HB四連式牛津杯?!景b規(guī)格】10個/包,分別裝在一次性無平皿中。【預期用途】應用于藥敏試驗。【檢驗原理】將HB四連式牛津杯放置于已制備好的平板上,加上抑劑,培養(yǎng)后觀察抑圈直徑。【主要組成成份】塑料支架固定的四個塑料杯?!緝Υ鏃l件及有效期】儲存條件:室溫保存;有效期:密封保存3年?!具m用儀器】適用實驗室配套儀器?!緲颖疽蟆繕颖镜氖占Υ?、處理、運輸應密封完好,避免污染?!緳z驗及使用方法】1、制備底層培養(yǎng)基:取直徑為90mm平皿,注入約15mL-20mL加熱融化的培養(yǎng)基(其中塑料平皿加入15mL,玻璃平皿加入20mL),使其在平皿底部均勻攤布,放置在水平臺面上使其凝固,作為底層;2、制備層 :另取適量培養(yǎng)基加熱融化后,放冷至48-50℃(芽孢可至60℃),加入適量的懸液(能得到清晰的抑圈為度),搖勻,用移液器(槍頭滅)吸取5 mL上述培養(yǎng)基快速注入平皿中央,按同一方向輕輕搖動平皿使其在底層上均勻攤布,作為層(注意事項:層培養(yǎng)基表面一定要平整,否則會導致漏液)放置在水平臺上冷卻;3、放置HB四連式牛津杯 :用無鑷子夾住HB四連式牛津杯正面的凸點(中央有凸點且平衡翼上標有“生物”字體的為產品正面),將其放置在層培養(yǎng)基表面上,將壓杯板蓋上,壓住牛津杯5秒左右,使4個小杯與培養(yǎng)基表面緊密接觸,防止出現(xiàn)縫隙導致漏液,然后小心拿走壓杯板(壓杯板已經輻照滅,可以直接使用;多次使用,可用酒精棉擦拭即可);4、加入,進行培養(yǎng) :向小杯中加入,將平皿平穩(wěn)轉移至培養(yǎng)箱培養(yǎng)(轉移過程中輕拿輕放,避免劇烈震動) 。

培養(yǎng)基C(EP標準) 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于效價測定稱取本品20.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅15min,備用。

培養(yǎng)基B(EP標準) 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于效價測定稱取本品45.0g,另取吐溫80 10.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅15min,備用。

培養(yǎng)基1(USP) 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于微生物方法測定效價稱取本品25.5g,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝,121℃高壓滅15min,備用。

培養(yǎng)基2(USP) 英文名稱:Medium 2 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于微生物方法測定效價稱取本品25.5g,加熱溶解于1000ml純化水中,分裝,121℃高壓滅15min,備用。

檢定培養(yǎng)基 8 號 英文名稱: 產品規(guī)格:250g 產品用途:用于萬古霉素效價測定的層培養(yǎng)基用途:用于萬古霉素效價測定的層培養(yǎng)基。成分(g/L)Peptone/蛋白胨 6.0Yeast Extract/酵母浸粉 3.0Beef Extract/牛肉浸粉 1.5Agar/ 瓊脂 15.0pH值5.9 ± 0.1 25℃用法:稱取本品 25.5g,加熱溶解于 1000ml 純化水中,分裝,121℃高壓滅 15分鐘,備用。規(guī)格:250g有效期: 三年


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