產品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產品名稱：人型支原體PCR檢測試劑盒
產品規(guī)格：50T
產品貨號：FS-P63726
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）

賴諾普利 Lisinopril Dihydrate 83915-83-7  質量規(guī)格：>98%,二水合物可用于細胞培養(yǎng)

樹脂法骨DNA萃取試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

美他環(huán)素,甲烯土霉素(標準品) Metacycline HCl;Methacycline HCl 3963-95-9 質量規(guī)格：分析標準品

食物谷氨酸比色法定量檢測試劑盒  進口/國產 規(guī)格：20次

冰凍切片糖原高希爾（PAS）法染色試劑盒 進口/國產 規(guī)格：50次

細胞5-羥色胺-N-乙?；D移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

精液組分氧化應激活性氧（ROS）魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：50次

受精（fertilization）細胞培養(yǎng)液 進口/國產 規(guī)格：500毫升

壬苯醇醚（標準品） POLYETHYLENE GLYCOL MONO-4-NONYLPHENYL ETHER 26027-38-3 質量規(guī)格：含量測定

阿魏酸鈉 Sodium ferulic 24276-84-4 質量規(guī)格：>99%

βAMYLOID蛋白共沉淀分析試劑盒 進口/國產 規(guī)格：5次

石蠟切片組織CASPASE-7蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10/20次

 載玻片細胞ERK蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10/20次

?；蛆Z去氧膽酸(標準品) Taurochenodeoxycholic acid 516-35-8 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

通用型人體腺病毒（adenovirus）定性檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

茶黃素(標準品) Theaflavin 1011850 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人型支原體PCR檢測試劑盒肉湯培養(yǎng)基D 英文名稱：Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于沙門氏檢驗前增或大腸群檢測。產品用法：稱取本品 13 克，溶解于1000ml蒸餾水中， 分裝試管，116℃高壓滅15分鐘備用。質量控制和典型特征:在36±1℃培養(yǎng)24±2 h，大腸群、大腸桿和發(fā)酵乳糖的細產生氣體，在小倒管內有氣泡；其它細無氣泡。

增肉湯培養(yǎng)基E 英文名稱：Enrichmentbroth medium E 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于腸桿科細的增培養(yǎng)用途:用于腸桿科細的增培養(yǎng)。用法Suspend 45.0g / liter,and heat to boiling for 1 to 2 minutes. Transfer 120-ml portions to 250-ml volumetric flasks or 9-ml portions to test tubes, all being capped with cotton plugs or loose-fitting caps. Heat at 100 °C for 30 min and cool immediately.稱取本品 45.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶每瓶120ml或分裝試管 ,每管 9ml,100℃水浴加熱 30 分鐘 , 迅速在流動的冷水中冷卻,無需高壓滅。

瓊脂培養(yǎng)基F 英文名稱：Agar medium F 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于腸道計數(shù)和腸桿科鑒別用途:用于腸道計數(shù)和腸桿科鑒別。用法Suspend 51.5g / liter.Heat to boiling, but do not heat in an autoclave. Pour onto plates.稱取本品 51.5g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,煮沸不要超過 2 分鐘,無需高壓滅。臨用時制備不得超過 3 小時。

肉湯培養(yǎng)基G 英文名稱：Broth medium G(MacConkey broth) 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于大腸桿、大腸群的檢測用途用于大腸桿、大腸群的檢測。用 法稱取本品35克，加熱攪拌溶解于1000ml 蒸餾水中，分裝試管，并在每個試管中加一個小倒管，121℃高壓滅15分鐘，備用。質量控制和典型特征在35℃培養(yǎng)24-48h，大腸桿和大腸群在小倒管內產生氣泡并使培養(yǎng)基顏色由紫色變成黃色。

瓊脂培養(yǎng)基H 英文名稱：Agar medium H(MacConkey agar) 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于腸道致病的選擇性分離培養(yǎng)。用途:用于腸道致病的選擇性分離。用法稱取本品 50.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘備用

肉湯培養(yǎng)基I 英文名稱：Broth medium 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于沙門氏選擇性增培養(yǎng)。產品用法：稱取本品 93.55 克， 溶解于1050ml蒸餾水中，加熱煮沸，臨用前加入20%碘液20ml ，0.5%磺綠2ml，現(xiàn)配現(xiàn)用，不宜久置。質量控制和典型特征:接種10-100個沙門氏，在37℃培養(yǎng)24±2 h生長明顯，溶液混濁。用接種環(huán)劃線接種到DHL和BS平板或其它選擇性平板上。本培養(yǎng)基在試管底部有一層白色沉淀物。

瓊脂培養(yǎng)基J 英文名稱：Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于沙門氏選擇性分離培養(yǎng)用途:用于沙門氏和志賀氏的分離培養(yǎng)。用法稱取本品 69.52g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,煮沸 1 分鐘，冷至 50℃左右時,傾入無平皿,無需高壓滅。

瓊脂培養(yǎng)基K 英文名稱：Agar medium K (Xylose,lysine,deoxycholate agar) 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于沙門氏選擇性分離培養(yǎng)產品用法：稱取本品5.52g，加熱攪拌溶解于100ml蒸餾水中，煮沸2分鐘，冷至50℃左右時，傾入無平皿，無需高壓滅。

瓊脂培養(yǎng)基L 英文名稱：Agar medium L 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于沙門氏的選擇性分離培養(yǎng)用途:用于沙門氏(除傷寒沙門氏和志賀氏外)的分離培養(yǎng)用法Suspend 58.0g / liter.Autoclave 15 min at 121°C. Cool to 45-50°C, and pour portions into sterile petri dishes. Do not store more than 1 day.稱取本品 58.0g, 加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,冷至 45-50℃左 右傾入無平皿。本培養(yǎng)基當天使用。

瓊脂培養(yǎng)基M 英文名稱：Agar medium M (Triple sugar,iron agar) 產品規(guī)格：250g 產品用途：于腸桿科細的生化反應篩選。用途用于腸桿科細的生化反應篩選。用 法稱取本品64.5克,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾中,加熱煮沸1分鐘,分裝于16mm×150mm試管，121℃高壓滅15分鐘。制成斜面長4-5cm,底2-3cm。質量控制和典型特征在37℃培養(yǎng)18-24小時，沙門氏在試管的斜面產堿，顯紅色；底部產酸，顯黃色；產或不產，培養(yǎng)基變黑色或不變黑色。