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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:水痘-帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P63744
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
水痘-帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:水痘-帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P63744
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

(6R)-四氫-L-硫酸生物蝶呤-d3(非對映異構(gòu)體混合物) (6R)-Tetrahydro-L-biopterin-d3 Sulfate(Mixture of Diastereomers) 103130-44-5 (unlabeled) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

細(xì)尼羅紅染色試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:100次

D-核糖 D-(-)-Ribose 50-69-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

通用型丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

Crovatin Crovatin 142409-09-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

地塞米松,氟美松(標(biāo)準(zhǔn)品) Dexamethasone 18296 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

4-羥基氨苯蝶啶 4-Hydroxy Triamterene 1226-52-4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

阿米舒必利-d5 Amisulpride-d5 71675-85-9 (unlabeled) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口

6-硫鳥嘌呤 6-TG/Thioguanine 154-42-7 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR

佐米曲普坦 Zolmitriptan 139264-17-8 質(zhì)量規(guī)格:>99%

3-氨基-1,2,4-三唑 3-AT 61-82-5 質(zhì)量規(guī)格:>96%,分子生物學(xué)級

糖果糖精(saccharin)含量比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

4-烯丙氧基-2-羥基二苯甲酮(>97.0%(HPLC)(T)) 4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone 2549-87-3 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)

谷氨酰胺待測樣品處理試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

/酵母氨含量光譜法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

糖化血清白蛋白(GSP)化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

水痘-帶狀皰疹病毒PCR檢測試劑盒BG11培養(yǎng)基 英文名稱:BG11 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于藍(lán)藻細(xì)培養(yǎng)用途:用于藍(lán)藻細(xì)培養(yǎng)。用法稱取本品 1.70g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

ISP培養(yǎng)基3 英文名稱:ISP Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于鏈霉的培養(yǎng)用途:用于鏈霉的培養(yǎng)。用法稱取本品 38.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

固氮螺培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于固氮螺平板計數(shù)稱取本品39.4g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅30min,備用。

芽孢桿培養(yǎng)基 英文名稱:Bacillus Megatherium Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于芽孢桿平板計數(shù)用途:用于芽孢桿平板計數(shù)。成分(g/L)葡萄糖 10.0磷 5.0硫酸銨 0.5氯鉀 0.2七水硫酸鎂 0.1硫酸錳 0.0001硫酸亞鐵 0.0001酵母提取物 0.5瓊脂 20.0pH值7.0 ± 0.2 25℃用法稱取本品 36.3g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅30 分鐘,備用。

根瘤培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于根瘤平板計數(shù)稱取本品26.83g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅30min,備用

弗拉特氏培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于弗拉特氏平板計數(shù)稱取藥品53.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅30min,備用

BM液體培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于醋不動桿增培養(yǎng)稱取本品13.51g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,111℃高壓滅15min,備用。

BM固體培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于醋不動桿增培養(yǎng)用于醋不動桿增培養(yǎng)稱取本品27.51g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,110℃高壓滅15min,備用

BF839計數(shù)選擇培養(yǎng)基 英文名稱:BF839 Bacterium Count Selective Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于脆弱擬桿BF839固體平板計數(shù)用途:用于脆弱擬桿 Bf839 固體平板計數(shù)。用法稱取本品 50.4g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝每瓶 200ml,115℃高壓滅 20 分鐘,冷至 46℃左右時,每 200ml 培養(yǎng)基中加入過濾除維生素 K1(0.1%)2ml 和小牛血清 8ml,混勻,傾入無平皿,備用。

BYP瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于巴氏桿分離培養(yǎng)用于巴氏桿分離培養(yǎng)稱取本品44.6g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶200ml,121℃高壓滅15min,冷至約50℃左右時,每200ml培養(yǎng)基中加入無消化液10ml,卡那霉素3mg和桿肽1.25mg,混勻,傾入無平皿備用。

 


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