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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):肺吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):FS-P63780
  • 產(chǎn)品廠商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
肺吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):肺吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P63780
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

5-羥基色氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) 5-HTP 895096 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品,L構(gòu)型

五味子醇甲(標(biāo)準(zhǔn)品) Schisandrol A 7432-28-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

鹽酸利托君 Ritodrine HCl 23239-51-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

小量質(zhì)粒抽提試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20/50/100次

乙酸鎳四水(>98%,BC) Nickel (II) acetate, tetrahydrate 6018-89-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

血液逆轉(zhuǎn)錄酶(REVERSE TRANSCREPTASE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

卡培他濱-2',3'-環(huán)狀碳酸酯 Capecitabine-2',3'-cyclic Carbonate 921769-65-5 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

 冰凍切片組織IGF 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

 冰凍切片組織IL蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

庚二酸(>98%,BR) Pimelic acid 111-16-0 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

撲熱息痛/對(duì)乙酰氨基酚 Paracetamol(Acetaminofen polvo) 103-90-2 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

1-甲基-1,2,4-三唑 1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE 6086-21-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%

全反式甲酯視黃酸 all-trans Retinoic Acid Methyl Ester 339-16-2 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

PDGF-A蛋白共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:5次

 GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:5次

肺吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒變形桿成套生化鑒定管(BXWS) 英文名稱(chēng):BXWS 產(chǎn)品規(guī)格:13種*1套/盒*10盒 產(chǎn)品用途:用于變形桿的生化鑒定用于變形桿的生化鑒定每盒包括:尿素1支、苯丙氨酸酶1支、西蒙氏枸櫞酸鹽1支、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶1支、氨基酸脫羧酶對(duì)照1支、明膠1支、脂酶(玉米油) 1支、D-甘露醇1支、色氨酸肉湯(蛋白胨水)1支、麥芽糖1支、木糖1支、水楊苷1支、七葉苷水解1支、共13種生化鑒定管并含無(wú)液體石蠟1支。

創(chuàng)傷弧成套生化鑒定管 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:9種*2套/盒*5盒 產(chǎn)品用途:用于創(chuàng)傷弧生化鑒定1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:從包裝盒中取出安瓿瓶,用砂輪在瓶頸上劃一圈,朝易折點(diǎn)(瓶頸上方藍(lán)點(diǎn)),反方向用力折開(kāi)安瓿瓶,插入安瓿瓶試管架中。如果染或變色,則不能使用,重新拿一支。2、接種方法:從選擇性瓊脂平板(mCPC或CC平板)上挑取三個(gè)或以上可疑落,劃線(xiàn)接種到3%氯鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板進(jìn)行純化培養(yǎng)(36±1℃培養(yǎng)18-24h),取純化落做氧化酶試驗(yàn)和接種3%氯鈉三糖鐵瓊脂、嗜鹽性試驗(yàn)、3%氯鈉賴(lài)氨酸脫羧酶、3%氯鈉氨基酸脫羧酶對(duì)照、3%氯鈉V-P半固體和3%氯鈉ONPG。本成套生化鑒定管不含3%氯鈉三糖鐵瓊脂。請(qǐng)參照標(biāo)準(zhǔn)操作程序判斷結(jié)果。直接接種:用接種針從平板上挑取已純化培養(yǎng)的同一落接種于需要試驗(yàn)的生化管中。懸液法:取一內(nèi)盛2ml無(wú)水或無(wú)鹽水試管,用接種針從純化培養(yǎng)的平板上挑取單個(gè)落至無(wú)水中仔細(xì)研磨制成0.5麥?zhǔn)蠞岫鹊木患?xì)懸液,滴入需要試驗(yàn)的試管中,每管3滴。其中固體和半固體生化管采用穿剌接種。接種完后放37℃培養(yǎng)。

變形桿成套生化鑒定管(SN) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:13種/盒*10 產(chǎn)品用途:變形桿成套生化鑒定管(SN)變形桿成套生化鑒定管(SN)組成:苯丙氨酸脫羧酶1支、尿素酶1支、明膠生化管1支、西蒙氏枸櫞酸鹽1支、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶肉湯1支、色氨酸肉湯1支、氨基酸脫羧酶對(duì)照1支、木糖1支、麥芽糖 1支、肌醇1支、甘露醇1支、核糖醇1支、1支、無(wú)液體石蠟1支。

大腸桿成套(新國(guó)標(biāo)) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:4種*4套 產(chǎn)品用途:用于大腸桿成套生化鑒定用于大腸桿鑒定

SIM生化管 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:20支/盒 產(chǎn)品用途:用于單增李斯特氏的生化用途:用于單增李斯特氏的生化。

0.4mg無(wú)硫代硫酸鈉水溶液 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:0.4mg/支*20 產(chǎn)品用途:添加在水樣采集袋里使用添加在水樣采集袋里使用致瀉大腸埃希氏生化套裝

致瀉大腸埃希氏生化套裝 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:8種*2套/盒 產(chǎn)品用途:用于致瀉大腸埃希氏生化鑒定。用于致瀉大腸埃希氏生化鑒定。

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