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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:衣原體通用型(CP)PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P64048
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
衣原體通用型(CP)PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
詳情介紹:

實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:衣原體通用型(CP)PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P64048
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

細胞HPV7(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7)病毒定性檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

全組織茜素紅(ALIZARIN RED S)鈣染色試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次

 水質(zhì)污染ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

細胞中性脂質(zhì)尼羅紅染色試劑盒  進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

血液(NO)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次

銦標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸) Indium standard 7440-74-6 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸

石蠟切片組織線粒體復合物IV蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

植物S腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcy nucleosidase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

來那替尼 Neratinib(HKI-272) 698387-09-6 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

淫羊藿次苷F2 Icariside F2 115009-57-9 質(zhì)量規(guī)格:BR,美國進口

活體細胞半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性原位熒光染色檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

植物細胞葉綠體DNA萃取試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

O-脫芳香基雷諾嗪 O-Desaryl Ranolazine 172430-46-5 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

細單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

硫酸新霉素(標準品) Neomycin sulfate 1405-10-3 質(zhì)量規(guī)格:效價測定

衣原體通用型(CP)PCR檢測試劑盒phospho-P53(Thr18)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

IGFBP4/IBP4  胰島素樣生因子結合蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Dog IgM/Cy5  Cy5標記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cyclin B3  周期素B3抗體 規(guī)格: 0.2ml

EGFR5/CLEC14A  表皮生因子受體5抗體 規(guī)格: 0.2ml

HDAC9  組蛋白去乙?;?抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlCDC2L1  細胞分裂周期蛋白2亞型1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD5L/Api6  CD5L抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

MYOM2  肌間蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlMVK  甲羥戊酸激酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-6  白介素6抗體 規(guī)格: 0.1mlGLP-1(1G9)  GLP-1單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

CABLES2  細胞周期蛋白依賴性激酶CABLES2抗體 規(guī)格: 0.2mlGentamicin  慶大霉素抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bov IgG/PE  PE標記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1mlPhospho-PLC gamma 1(Ser1248)  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Integrin beta 6  整合素β6抗體(Integrin β6) 0.2mlAdenylate Kinase 1/AK1  苷酸激酶-1抗體 規(guī)格: 0.2ml

LAMP-3/DC-LAMP/CD208  溶酶體相關膜蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HER3(Tyr1328)  磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Exendin 4  GLP1類似蛋白Exendin4抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-LSP1 (Ser204)  磷酸化白細胞F肌動蛋白結合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Bovine IgG/Cy7  Cy7標記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlCR1/CD35  Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體) 規(guī)格: 0.1ml


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