細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	L6大鼠成肌細胞	英文名稱	L6:L6
產(chǎn)品貨號	A01X1136	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	貼壁細胞	細胞形態(tài)	成肌細胞樣
產(chǎn)品種屬	大鼠	凍存條件	凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	骨胳??；成肌細胞	用途	僅供科研研究實驗

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成肌細胞樣

生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 L6成肌細胞是由Yaffe從甲基膽蒽存在下大鼠大腿肌的原代培養(yǎng)物初兩代中分離得到。L6細胞在培養(yǎng)基中可融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維。L6細胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降；因而，L6細胞應冷凍于低代次階段并周期性地重新克隆以選擇融合能力強的細胞。如果讓培養(yǎng)容器中的細胞長滿，L6細胞的成肌組分將迅速耗盡。

組織來源 骨胳?。怀杉〖毎?span lang="EN-US">

細胞類型 轉(zhuǎn)化細胞系

生物等級 1

基因表達情況 myosin

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1458 BCRJ; 0141

巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體 BBS12       斑聯(lián)蛋白抗體 Zyxin

CD299抗體 CD299       CoREST2蛋白抗體 CoREST2

線粒體核糖體蛋白S26抗體 MRPS26       小腦肽1抗體 CBLN1

周期素依賴性激酶5單克隆抗體 CDK5       轉(zhuǎn)錄源蛋白質(zhì)CUX2抗體 Cux2

MOGAT3蛋白抗體 MOGAT3       NDUFS2抗體 NDUFS2

磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1 Phospho-PDK1 (Ser241)       磷酸化SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白2抗體 phospho-SH3BP2 (Ser427)

谷氧還蛋白5抗體 Glutaredoxin 5      含patatin樣磷脂酶6抗體 PNPLA6/NTE

溶質(zhì)載體家族25成員43抗體 SLC25A43       神經(jīng)細胞NB3特定蛋白抗體 Contactin 6大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)elisa檢測試劑盒       細胞BAX蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

1號染色體開放閱讀框186抗體       C1orf186

Ral鳥苷酸酶活性分析試劑盒       小鼠EGF樣域蛋白7(EGFL7)elisa檢測試劑盒

小鼠細胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)elisa檢測試劑盒       大鼠非轉(zhuǎn)移細胞1表達NM23A蛋白(NME1)elisa檢測試劑盒

烏頭酸酶（aconitase）活性熒光定量檢測試劑盒       人蛋白水解誘導因子/皮離蛋白(PIF/DCD)elisa檢測試劑盒

即用型LB液體培養(yǎng)基Amp+ 60VIA       通用型HRP復合物穩(wěn)定/稀釋溶液

L6大鼠成肌細胞小鼠凋亡誘導因子(AIF)elisa檢測試劑盒       大鼠Rho鳥苷酸交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)elisa分析檢測試劑盒

白細胞介素27抗體       IL27

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。