細胞簡介：
大鼠肺動脈內(nèi)皮細胞分離自肺動脈組織；肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行。細胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。肺動脈內(nèi)皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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肺動脈 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1516 |
僅供科研研究實驗 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠肺動脈內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠肺動脈內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的大鼠肺動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細胞傳代：當單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞，消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可，當然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況，一旦達到消化完成（皺縮細胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
LMO7蛋白抗體
LMO7
銅轉運蛋白CUTC抗體
CUTC
大鼠磷酸化胰島素受體(phosphorylated ISR)elisa檢測試劑盒
/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒
皮質酮（CORT）含量ELISA檢測試劑盒
通用型雞產(chǎn)蛋下降綜合征（EDS）基因檢測試劑盒
釀酒酵母核孔蛋白NSP1抗體
Nsp1p
A型流感病毒H5N6凝集素
H5N6 hemagglutinin
鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體 Anti-TRIAD3
蛋白激酶B Anti-AKT1/PKB
磷酸激酶1抗體 Anti-PGK1
絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶3B抗體 Anti-SMEK2/PP4R3B
磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體
phospho-SYN1 (Ser603)
嗅覺受體5K1抗體
OR5K1
軟骨細胞蛋白39抗體 Anti-YKL39/CHI3L2
腫瘤轉移抑制基因H4抗體 Anti-NME4/nm23-H4
G蛋白結合蛋白RAB38抗體 Anti-RAB38
磷酸化SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體 Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020)
大鼠U型肌酸激酶,線粒體(CKMT1A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠肺動脈內(nèi)皮細胞CKMT1A ELISA kit
人果糖胺(FRA)elisa分析檢測試劑盒
FUT 12; FUT12; GDP fucose protein O fucosyltransferase 1; GDP-fucose protein O-fucosyltransferase 1; O Fuc T; o fucosyltransferase protein; O FucT 1; O FucT; O FucT1; O FUT; O-FucT-1; OFUT 1; OFUT; OFUT1; OFUT1_HUMAN; Peptide O fucosyltransferase1; Peptide-O-fucosyltransferase 1; Pofut 1; POFUT1; Protein O fucosyltransferase1.
大鼠肺動脈平滑肌細胞
豬胰腺導管上皮細胞
A172人膠質母細胞瘤細胞
4T1小鼠乳腺癌細胞