產(chǎn)品名稱
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1681
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰蛋白酶，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，
細(xì)胞簡介：
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自骨組織；股骨頭（caput
femoris）呈圓形，約占一圓球的2/3，其上完全為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋，在其頂部微后有一小窩，稱為股骨頭凹，為股骨頭韌帶附著處，股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀，后微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞；骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯，與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切，參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用混合膠原酶消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，細(xì)胞純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
cAMPELISAKit
胰島細(xì)胞自身抗原1抗體
ICA1
細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體
AFF4
DNA南方雜交印跡消除試劑盒
BL21DE3感受態(tài)細(xì)胞 20 x 100μl
微型RNA（miRNA）擴(kuò)增試劑盒
小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa檢測試劑盒
三聚氰胺抗體
Melamine
1號染色體開放閱讀框124抗體
C1orf124
環(huán)指蛋白94抗體 Anti-Trim22/Staf-50/RNF94
受體輔助蛋白1抗體 Anti-REEP1
黑色素瘤硫酸軟骨素蛋白多糖4抗體 Anti-NG2/CSPG4
空泡分選蛋白18抗體 Anti-VPS18
腦腫瘤抑癌蛋白1抗體
Tomoregulin-1
凋亡誘導(dǎo)受體TNFRSF25抗體
D3R
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 Anti-SLC2A4RG
陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-OCT2
外周蛋白抗體 Anti-peripherin
甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 Anti-TTF1/NKX2.1
狗IgM（親和純化)
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞Dog IgM
組蛋白去乙酰化酶4重組兔單克隆抗體
Apoptosis related cysteine protease; Apoptosis related cysteine protease; CASP 14; CASP-14; CASP14; Caspase 14 apoptosis related cysteine protease; Caspase 14 apoptosis related cysteine protease; Caspase 14 precursor; Caspase 14 precursor; Caspase-14 subunit p10; Caspase-14; Caspase-14; Caspase14; CASPE_HUMAN; MGC119079; MICE; MICE; Mini ICE; Mini ICE.
大鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞
豬皮膚成纖維細(xì)胞
AC16人心肌細(xì)胞
A129L人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞