培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
冠狀動(dòng)脈
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1534
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈，起于主動(dòng)脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干，發(fā)自左主動(dòng)脈竇，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細(xì)胞，它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
通用型HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒
細(xì)胞溶酶體脂酶（酸性脂酶）活性染色試劑盒
人HIV(1+2)抗原抗體elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠Tau蛋白elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CCK-1(水溶性四氮唑－1 )比色法細(xì)胞繁殖測(cè)定試劑盒
山羊睪酮(T)elisa檢測(cè)試劑盒
動(dòng)物源性食品鴨源基因檢測(cè)試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體 GLUT6
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員26A抗體 KIF26A
G蛋白偶聯(lián)受體69B LANCL2
HER2受體轉(zhuǎn)換蛋白2抗體 TOB2
有絲分裂氧化酶1抗體 Nox1
載脂蛋白L1抗體 APOL1
紡錘體檢查點(diǎn)蛋白抗體 Bub1
富含亮氨酸α2糖蛋白抗體 LRG1
硒特異延伸因子/SELB抗體 EEFSEC
細(xì)胞角蛋白19片段(CYFR21-1)抗體 Cytokeratin 19
TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1C抗體 TAF1C
T細(xì)胞活化蛋白MRFAP1抗體 MRFAP1
AF750標(biāo)記的CD20抗體 CD20, Alexa Fluor 750 conjugated
APC-Cy7標(biāo)記人/小鼠CD11b單克隆抗體 human/mouse CD11b/APC-Cy7
精子發(fā)生相關(guān)蛋白15抗體 SPATA15/SPATC1
跨膜蛋白28/TMEM28抗體 FAM155B
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞DAB顯色試劑盒藍(lán)
石蠟切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
DHHC 21; DNZ1; GABA A receptor-associated membrane protein 3; HSPC097; Probable palmitoyltransferase ZDHHC21; Zinc finger DHHC domain containing protein 21.
大鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
beas-2b人支氣管上皮細(xì)胞
A2780人卵巢癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。