產(chǎn)品名稱
大鼠肌腱干細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肌腱組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1676
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠肌腱干細胞分離自肌腱組織；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構(gòu)成，色紅質(zhì)軟，有收縮能力，肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成，色乳白較硬，沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細胞（TSCs）是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細胞，其具有多向分化潛能，并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時該細胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細胞的普遍特性。肌腱干細胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細胞、軟骨樣細胞、骨細胞分化；在裸鼠模型中，肌腱干細胞還可以形成肌腱樣組織，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力，軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達更高，具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力，因此可以作為組織工程中的種子細胞。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠肌腱干細胞采用膠原酶、中性蛋白酶混合消化法并通過肌腱干細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠肌腱干細胞經(jīng)CD44熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠甲狀旁腺(PTH)elisa檢測試劑盒
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4抗體
LRP4
細胞色素P450 27C1抗體
CYP27C1
人體IL-17基因甲基化檢測試劑盒
DNAFect轉(zhuǎn)染試劑 500μl
通用型微型RNA（miRNA）擴增試劑盒
小鼠胱天蛋白酶7(Casp-7)elisa檢測試劑盒
癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體
Oncomodulin
人巨細胞病毒UL49蛋白抗體
HCMV UL49
胸腺肽α1抗體 Anti-Thymosin Alpha-1/PTMA
腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 Anti-PEPT2/SLC15A2
鞘脂激活蛋白原抗體 Anti-PSAP
T細胞識別的鱗狀細胞抗原抗體 Anti-SART1
磷酸化合成酶3（內(nèi)皮型）抗體
Phospho-eNOS (Ser632)
嗅覺受體5R1抗體
OR5R1
鋅結(jié)合乙醇脫氫酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 Anti-ZADH1
尼曼匹克C2前體蛋白抗體 Anti-NPC2/Niemann Pick C2
環(huán)指蛋白36抗體 Anti-RNF36
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK2抗體 Anti-SLITRK2
大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白RhoE elisa分析檢測試劑盒
大鼠肌腱干細胞Rat Rho-related GTP Binding Protein RhoE ELISA Kit
人胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析檢測試劑盒
TF-1 cell apoptsis-related gene 19; Programmed cell death protein 5; TF-1 cell apoptosis-related protein 19; Protein TFAR19; PDCD5.
大鼠脊髓成纖維細胞
羊支氣管上皮細胞
C-33A人宮頸癌細胞
A549 人肺癌細胞