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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:LS411N人直腸癌細(xì)胞 多巴胺受體D4抗體 HIF3A ELISA Kit 馬缺氧誘導(dǎo)因子檢測試劑盒 膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體 人腦微血管平滑肌細(xì)胞永生化;HBVSMC-SV40T
詳情介紹:

培養(yǎng)方法與步驟:


①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。

⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。




產(chǎn)品名稱

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

組織來源

氣管

生長特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

分類

大鼠原代細(xì)胞

貨號

A01X1521

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

培養(yǎng)信息:


培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

細(xì)胞簡介:


大鼠氣管平滑肌細(xì)胞分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C”字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠氣管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、、酵母和等。


公司正在出售的產(chǎn)品:


sRANKLELISAKit

大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)elisa分析檢測試劑盒

E-Cad ELISA Kit

人谷氨酸谷草轉(zhuǎn)氨酶2,線粒體(谷草轉(zhuǎn)氨酶2)(GOT2)elisa分析檢測試劑盒

HumanGOT2ELISAKit

大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)elisa檢測試劑盒

LEUCOCYTE ELASTASE

活性檢測試劑盒-AlamarBlue1000T

LOWRY蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒

乙?;M蛋白H2B K15抗體

Histone H2B (acetyl K15)

5-羥色胺受體6抗體

5HT6 Receptor

大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)elisa檢測試劑盒

絲狀蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T

人鈣結(jié)合蛋白S100A14 elisa檢測試劑盒

小量腺病毒沉淀法純化試劑盒

p400蛋白抗體

p400

鈣加壓素2抗體

Calcipressin 2

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體  Anti-Transthyretin/Prealbumin

前纖維蛋白2抗體  Anti-Profilin 2

蛋白磷酸酶2Cα抗體  Anti-PP1A/PP2CA/PPP1CA

肺表面活性蛋白C抗體  Anti-SP-C

堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗兔IgG H&L

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞Mouse Anti-Rabbit IgG H&L / AP

新朊蛋白抗體(C端)

2410091M23Rik; Developmental pluripotency associated 4; Developmental pluripotency associated protein 4; Developmental pluripotency-associated protein 4; Dppa 4; DPPA4; DPPA4_HUMAN; FLJ10713.

大鼠氣管上皮細(xì)胞

小鼠脂肪細(xì)胞

D341 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

AsPC-1 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞

原代細(xì)胞步驟


1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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