產(chǎn)品名稱
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
腦組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
神經(jīng)元細(xì)胞樣
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1713
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動(dòng)和活動(dòng)的較**神經(jīng)所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區(qū)和視上區(qū)）﹑中部（結(jié)節(jié)區(qū)）和后部（體區(qū)）。下丘腦具有許多細(xì)胞核團(tuán)和纖維束﹐與神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過(guò)神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動(dòng)以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來(lái)自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系，可以接受很多神經(jīng)沖動(dòng)，為系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能，合成神經(jīng)垂體及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進(jìn)行體外培養(yǎng)，建立下丘腦神經(jīng)元體外實(shí)驗(yàn)平臺(tái)具有重要意義。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
FⅨELISAKit
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
BACE1 ELISA Kit
人黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)elisa分析檢測(cè)試劑盒
MART/Melan-AELISAKit
p53靶蛋白3抗體 Anti-TP53TG3
RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體 Anti-RAB40C
2型神經(jīng)纖維瘤抗體 Anti-NF2/Neurofibromin 2
神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白抗體 Anti-VGF/Nerve growth factor inducible
羊水通道蛋白5(AQP5)elisa分析檢測(cè)試劑盒
AQP5 ELISA kit
人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
NPELISAKit
細(xì)胞PDGF-B蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA分離試劑盒
小鼠谷氨酰胺合成酶(GS)elisa檢測(cè)試劑盒
軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子B受體抗體
Nogo B receptor
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體
GTF2A1 alpha
磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體 Anti-phospho-TIRAP(Tyr86)
磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 Anti-Phospho-PERK(Thr980)
穿孔素抗體 Anti-Perforin
細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 Anti-Sidekick 2
Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG H&L
大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞Mouse Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy5.5
FAM83G蛋白抗體
b(2)gcn; B(2)GCN homolog; B4 integrin interactor; Binding protein of beta-4 integrin; CAB; eIF-6; EIF3A; Eukaryotic translation initiation factor 3A; Eukaryotic translation initiation factor 6; IF6_HUMAN; ITGB4BP; OK/SW-cl.27; p27 beta 4 integrin binding protein; p27(BBP); p27BBP; RP4-614O4.1.
大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞
小鼠心肌成纖維細(xì)胞
HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞
BICR 6人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞