培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠支氣管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
支氣管組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1522
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠支氣管上皮細(xì)胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由氣管分出的各級(jí)分枝，由氣管分出的支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細(xì)長(zhǎng)，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子，從而參與氣道炎癥及反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在**、慢性阻塞性肺、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮細(xì)胞采用-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pCMV5－RUNX3）
體液氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人α-內(nèi)肽(α-EP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素20(IL-20)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠突觸融合蛋白2(STX2)elisa檢測(cè)試劑盒
磷酸化外紡錘體極樣蛋白1抗體 Anti-phospho-Separase (Ser1073)
Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 Anti-ROCK1
核仁蛋白8抗體 Anti-NOL8
鋅指蛋白185抗體 Anti-ZNF185
重組葡萄球菌蛋白A抗體 Protein A
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抗體 TGF Beta 1
谷氨酸脫羧酶-65抗體(C端） GAD65
果蠅RhoGAP92B抗體 RhoGAP92B
MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體 MDMX
NADH氧化還原酶輔酶4樣蛋白抗體 NDUFA4L2
溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體 AGPAT1
乳腺癌雌調(diào)控蛋白GREB1抗體 GREB1
CD6抗體 CD6
C-肽抗體 C Peptide
磷酸化FMS樣激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr842)
磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 Phospho-SIRT1 (Ser47)
白介素3受體a（CD123）鏈抗體 IL3RA
胞漿蛋白SH3GL3抗體 SH3GL3
細(xì)絲蛋白2抗體 FLNC
心房鈉尿因子/心鈉素/心房利鈉肽/ANP單克隆抗體 Atrial natriuretic factor
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠支氣管上皮細(xì)胞組織蛋白提取試劑盒100T
ERK蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
Dimethylaniline monooxygenase [N oxide forming] 3; Dimethylaniline monooxygenase [N-oxide-forming] 3; Dimethylaniline monooxygenase 3; Dimethylaniline oxidase 3; dJ127D3.1; Flavin containing monooxygenase 3; FMO 3; FMO form 2; FMO II; FMO3; FMO3_HUMAN; FMOII; Hepatic flavin containing monooxygenase 3; Hepatic flavin-containing monooxygenase 3; MGC34400; TMAU; Trimethylamine monooxygenase.
大鼠脂肪干細(xì)胞
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞
HS683人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。