日本人妻中文久久久免费-免费一区二区三区黄片观看-亚洲天堂日韩欧美在线一区-成人午夜免费福利视频合集

產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
你添加了1件商品 查看購物車
簡單介紹:
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞 1號染色體開放閱讀框151抗體 IL-6R ELISA Kit 貓白介素檢測試劑盒 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體 人經(jīng)典型霍奇金瘤細(xì)胞株;L428 2
詳情介紹:


實(shí)驗(yàn)方法:

一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。


細(xì)胞簡介:


大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自主動(dòng)脈組織;主動(dòng)脈是體循環(huán)的動(dòng)脈主干。其運(yùn)行路徑為:升主動(dòng)脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動(dòng)脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動(dòng)脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動(dòng)脈裂孔移行為腹主動(dòng)脈,以上為胸主動(dòng)脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動(dòng)脈;髂總動(dòng)脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動(dòng)脈。主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞在心血管發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,以主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)研究對象,探討心血管相關(guān)發(fā)病機(jī)制是目前研究的熱點(diǎn);體外培養(yǎng)的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞對于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

貨號

用途

主動(dòng)脈組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

A01X1532

僅供科研研究實(shí)驗(yàn)


培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

方法簡介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。

公司正在出售的產(chǎn)品:


AAELISAKit

猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)elisa分析檢測試劑盒

LMA ELISA Kit

人泛素激活酶(E1/UBAE)elisa分析檢測試劑盒

E1/UBAEELISAKit

細(xì)胞凋亡抑制因子抗體  Anti-Survivin

RIT1蛋白抗體  Anti-RIT1

NIPAL2蛋白抗體  Anti-NIPAL2

WNK4抗體  Anti-WNK4

白細(xì)胞介素37抗體

IL-37

1號染色體開放閱讀框222抗體

C1orf222

肝素(heperin)活性比色法定量檢測試劑盒

核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)因子1(RFT1)elisa檢測試劑盒

磷酸二酯酶7BPhosphodiesterase 7B

小鼠彈性蛋白(ELN)elisa檢測試劑盒

棕櫚酰蛋白水解酶2抗體

PPT2

真核翻譯起始因子3亞基L/eIF3e蛋白抗體

IF3EI

尿卟啉原脫羧酶抗體  Anti-UROD

豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病抗體  Anti-PRRSV

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體  Anti-p35/CDK5P1

絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶2抗體  Anti-SPTLC2

APC標(biāo)記的羊抗人IgM

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Goat Anti-Human IgM / APC

FOXN4蛋白抗體

AF6q21; AF6q21 protein; DKFZp781A0677; FKHR2; FKHRL 1; FKHRL1; FKHRL1P2; Forkhead (Drosophila) homolog (rhabdomyosarcoma) like 1; Forkhead box O3A; Forkhead box protein O3A; Forkhead Drosophila homolog of in rhabdomyosarcoma like 1; Forkhead in rhabdomyosarcoma like 1; FOX O3A; FOXO2; MGC12739; MGC31925; FOXO3_HUMAN

大鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞

小鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞

HT-29 (HT29)人結(jié)腸癌細(xì)胞

C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞


實(shí)驗(yàn)具體步驟:


(1)動(dòng)物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;

(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺(tái)使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,

利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來,同時(shí)能夠消除部分結(jié)締組織等)

(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細(xì)頭

鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個(gè)無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時(shí),然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);


(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個(gè)細(xì)胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率;

(8)貼壁細(xì)胞傳代:當(dāng)單個(gè)細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進(jìn)行傳代,此時(shí)可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞,消化時(shí)間根據(jù)正常細(xì)胞消化時(shí)間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況,一旦達(dá)到消化完成(皺縮細(xì)胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個(gè)細(xì)胞時(shí)候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會(huì)再貼壁成功啦。

根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;

(9)鑒定:細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時(shí)候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。


姓名:
電話:
您的需求: