細(xì)胞簡介：
兔肝實質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞，生長營養(yǎng)需求高，在體外存活時間短；細(xì)胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質(zhì)豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官，在整個物質(zhì)代謝過程中具有廣泛而多樣的作用。
|
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
|
肝臟 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X2061 |
僅供科研研究實驗 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1代，不建議傳代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝實質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介：
實驗室分離的兔肝實質(zhì)細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔肝實質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)elisa檢測試劑盒
亞麻酸（C18:3）含量試劑盒
制備海藻糖比色法定量檢測試劑盒
組織及血液堿性磷酸酶（AKP/ALP）測試盒
大鼠葉酸(FA)elisa檢測試劑盒
小鼠補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)elisa檢測試劑盒
大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)elisa分析檢測試劑盒
細(xì)胞分泌型堿性磷酸酶化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)elisa檢測試劑盒免費代測
中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體 Midkine
腫瘤抑制基因NME2抗體 Nm23-H2/NME2
干擾素α4抗體 IFNA4
孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 Nociceptin receptor
KPNA3蛋白抗體 KPNA3
MAPK/ERK激酶3抗體 MEKK3
熱反應(yīng)蛋白12抗體 HRSP12
絨毛蛋白重組兔單克隆抗體 villin
Bruton激酶抑制劑蛋白抗體 IBTK
CD3D重組兔單克隆抗體 CD3D
李斯特菌菌體蛋白抗體 Listeria tropina
磷酸化Crk p38抗體 phospho-CRK (Tyr221)
γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗體 GCLC
白介素1α/IL-1α抗體 IL-1 Alpha Propeptide
細(xì)胞色素P450 2A13抗體 CYP2A13
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體 ADORA2B
大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)elisa檢測試劑盒
兔肝實質(zhì)細(xì)胞小鼠整合素β3(ITGβ3)elisa檢測試劑盒
人布盧姆綜合征蛋白(BLM)elisa檢測試劑盒
Muscarinic Acetylcholine receptor M3; cholinergic receptor, muscarinic 3; CHRM 3; CHRM3; HM 3; HM3; HM3; EGBRS; M3 muscarinic receptor; muscarinic 3; m3 muscarinic acetylcholine receptor; ACM3_HUMAN; muscarinic receptor M3; muscarinic cholinergic m3 receptor; muscarinic m3 receptor; Acetylcholine receptor(M3).
兔肝外膽管上皮細(xì)胞
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞
OVCAR-8人卵巢癌腺癌細(xì)胞
ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞