
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔頜下腺上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
頜下腺
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2106
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔頜下腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
兔頜下腺上皮細(xì)胞分離自頜下腺組織;頜下腺是下頜部的唾液腺,左右各一個。頜下腺屬于唾液腺的一種,主要的功能就是分泌唾液。機(jī)體共有三大唾液腺,包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方,接近下頜骨彎曲角附近,所以也叫下頜下腺(下頜骨下方的唾液腺),左右各一,由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管,主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細(xì)胞是一種高度分化的上皮細(xì)胞,在體外難以長期存活和保持分化狀態(tài);頜下腺的主要病理變化有:①頜下腺炎;②頜下腺囊腫;③頜下腺腫;④頜下腺結(jié)石。
方法簡介:
實驗室分離的兔頜下腺上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔頜下腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AcSDKPELISAKit
孕馬血清促性腺(PMSG)elisa分析檢測試劑盒
PMSG ELISA Kit
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-2sRαELISAKit
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)elisa檢測試劑盒
大鼠Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(KEAP1)elisa分析檢測試劑盒
TEM電鏡石蠟切片組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB間接檢測試劑盒(含HRP二抗)
人CD5分子樣蛋白(CD5L)elisa分析檢測試劑盒
14號染色體開放閱讀框146抗體
LRFN5/C14orf146
腦蛋白CG6抗體
Brain protein CG6
墨蝶蛉還原酶抗體 Anti-SPR/Sepiapterin reductase
環(huán)指蛋白138抗體 Anti-RNF138
神經(jīng)細(xì)胞蛋白Nav1抗體 Anti-Neuron navigator 1
鋅指蛋白148抗體 Anti-ZNF148/ZBP-89
精子生成相關(guān)蛋白3抗體
SPATA3
β晶體體蛋白A4/βA4-crystallin抗體
CRYBA4
細(xì)胞分化蛋白SEPT10抗體 Anti-SEPT10
蛋白酶體PSMβ6抗體 Anti-Proteasome 20S beta 6
蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體 Anti-PDI/P4HB/ERp57/PDIA3
Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體 Anti-TDP-43/TARDBP
Alexa Fluor 750標(biāo)記羊IgG
兔頜下腺上皮細(xì)胞Goat IgG / AF750
細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體
FA 1; FA; FA H; FA1; FAA; FACA; FAH; Fanca; FANCA_HUMAN; FANCH; Fanconi anemia complementation group A; Fanconi anemia complementation group H; Fanconi anemia group A protein; Fanconi anemia type 1; MGC75158; Protein FACA.
兔滑膜成纖維細(xì)胞
小鼠股動脈平滑肌細(xì)胞
RPMI8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
GIST(人胃腸間質(zhì)瘤細(xì)胞)
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。