產(chǎn)品名稱
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
腦動(dòng)脈
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2190
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織；腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán)；靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行，所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈；各級(jí)靜脈都沒(méi)有瓣膜，它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡；②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)；③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
C3ELISAKit
胰島素生長(zhǎng)因子樣家族成員1抗體
IGFL1
17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框104抗體
C17orf104
小鼠高半胱氨酸(Hcy)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa檢測(cè)試劑盒
體液鎂離子（Mg）濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒
人Salusin Alpha(Salusin α)elisa分析檢測(cè)試劑盒
MFSD7蛋白抗體
MFSD7
唐氏綜合征臨界區(qū)域蛋白4抗體
DSCR4
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體 Anti-TNFAIP3/A20
G蛋白相關(guān)RABX5抗體 Anti-RABX5/Rabex5
泛素連接酶NEDD4-2抗體 Anti-NEDD4L/NEDD4-2
血管活性腸肽抗體 Anti-VIP
轉(zhuǎn)錄因子SP4抗體
Transcription factor Sp4
線粒體核糖體蛋白L54抗體
MRPL54
5-羥色胺受體1B抗體 Anti-5-HTR1B
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 Anti-C1orf80/AIDA
多聚球蛋白受體抗體 Anti-PIGR
Toll樣受體8抗體 Anti-TLR8/CD288
Alexa Fluor 350標(biāo)記小鼠IgG（型對(duì)照)
兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Mouse IgG / AF350
HERC3 E3泛素蛋白連接酶抗體
Glucosidase beta; Acid beta glucosidase; Acid beta-glucosidase; Alglucerase; Beta glucocerebrosidase; BETA GLUCOSIDASE, ACID; Beta-glucocerebrosidase; betaGC; D glucosyl N acylsphingosine glucohydrolase; D-glucosyl-N-acylsphingosine glucohydrolase; EC 3.2.1.45 ; Gba protein; GBA1; GC antibody GCase; GCB; GLCM_HUMAN; GLUC; Glucocerebrosidase (alt.); Glucocerebrosidase; GLUCOCEREBROSIDASE PSEUDOGENE; Glucosidase beta; Glucosidase, beta, acid; Glucosidase, beta; acid (includes glucosylceramidase); Glucosylceramidase; Imiglucerase; Lysosomal glucocerebrosidase.
兔腦膜細(xì)胞
小鼠腹腔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
SK-MES-1人肺鱗癌細(xì)胞
HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞)