培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔腦膜細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦膜
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2192
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腦膜細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔腦膜細(xì)胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
方法簡介：
實驗室分離的兔腦膜細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔腦膜細(xì)胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
PTHELISAKit
內(nèi)皮細(xì)胞凋亡E蛋白CE1抗體
HYI
禽腦脊髓炎病毒AEV抗體
AEV polyprotein
小鼠高半胱氨酸(Hcy)elisa檢測試劑盒
大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa檢測試劑盒
體液甘油三酯（triglyceride）含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法
人Seryl- tRNA合成酶，細(xì)胞質(zhì)(SARS/SERS)elisa檢測試劑盒
減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體
MEI-1
1號染色體開放閱讀框122抗體
C1orf122
腫瘤壞死因子配體超家族成員7抗體 Anti-CD70/CD27L/TNFSF7
絲氨酸蛋白激酶1抗體 Anti-Rad53/SPK1
跨膜硫酸軟骨素蛋白聚糖C抗體 Anti-Neuroglycan C
磷酸化波形蛋白抗體 Anti-Phospho-Vimentin(Ser82)
早期生長應(yīng)答蛋白1靶向蛋白1抗體
TOE1
羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗體
CYP51A1
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1抗體 Anti-SDF-1/CXCL12
骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1) Anti-OPN/BSP
一種腫瘤抑制基因抗體（C端） Anti-PTEN/MMAC1(CT)
微管蛋白α/Tubulin α抗體 Anti-Tubulin-alpha 1
APC標(biāo)記大鼠IgG（型對照)
兔腦膜細(xì)胞Rat IgG / APC
鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白2抗體
AHUS3; ARMD13; C3b INA; C3b inactivator; C3B/C4B inactivator; C3BINA; CFAI_HUMAN; Cfi; Complement component I; Complement control protein factor I; Complement factor I; Complement factor I heavy chain; Complement factor I light chain; F1; factor I; FactorI; FI; I factor; IF; KAF; Konglutinogen activating factor; Light chain of factor I; OTTHUMP00000219728; OTTHUMP00000221928
兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠腹腔巨噬細(xì)胞
SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
HC11小鼠乳腺上皮細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。