培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
兔視網膜前體細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
視網膜
生長特性
半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)
圓形
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2244
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔視網膜前體細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
兔視網膜前體細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。
方法簡介：
實驗室分離的兔視網膜前體細胞采用胰蛋白酶消化法結合培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔視網膜前體細胞經Nestin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品：
FASELISAKit
皮質醇(Cortisol)elisa分析檢測試劑盒
Whale Cortisol ELISA Kit
人蛋白ATP1B4(ATP1B4)elisa分析檢測試劑盒
HumanATP1B4ELISAKit
小鼠熱休克因子1(HSF1)elisa分析檢測試劑盒
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KChIP2
胸腺活化調節(jié)趨化因子抗體
CCL17
大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)elisa檢測試劑盒
LEUCOCYTE ELASTASE
活性檢測試劑盒-AlamarBlue1000T
LOWRY蛋白質濃度定量試劑盒
RMND5B蛋白抗體
RMND5B
驅動蛋白家族成員1C抗體
KIF1C
斯鈣素抗體 Anti-Stanniocalcin 1
胞粘蛋白結合調節(jié)蛋白抗體 Anti-PSCDBP/CYTIP
溶質載體蛋白家族21成員2抗體 Anti-PGT/Slco2a1
突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體 Anti-Unc18-3
鏈霉親和素標記山羊抗兔IgG H&L
兔視網膜前體細胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / Streptavidin
半乳糖凝集素2抗體
85 kDa calcium independent phospholipase A2; 85 kDa calcium-independent phospholipase A2; CaI PLA2; CaI-PLA2; CaIPLA2; Calcium independent phospholipase A2; Cytosolic calcium independent phospholipase A2; Group VI phospholipase A2; GVI; GVI PLA2; INAD1; iPLA(2)beta; iPLA2; IPLA2 VIA; iPLA2beta; NBIA2A; NBIA2B; PA2G6_HUMAN; PARK14; Patatin like phospholipase domain containing 9; Patatin like phospholipase domain containing protein 9; Phospholipase A2 calcium independent; Phospholipase A2 calcium independent group VI A; Phospholipase A2 group VI; Phospholipase A2 group VI cytosolic calcium independent; PLA2; PLA2G6; PNPLA9; PLPL9_HUMAN
兔視網膜神經節(jié)細胞
兔主動脈外膜成纖維細胞
THLE-2人正常肝細胞
HEB人腦膠質細胞株；HEB人腦膠質細胞株
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。