培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔心臟微血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
心臟
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
內(nèi)皮細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2037
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔心臟微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
兔心臟微血管內(nèi)皮細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多**、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介：
實驗室分離的兔心臟微血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔心臟微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
sCD30LELISAKit
大鼠C型鈉尿肽(CNP)elisa分析檢測試劑盒
CNP ELISA Kit
人庚型肝炎病毒抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
HumanHepatitisGvirusantibodyIgMELISAKit
小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)elisa檢測試劑盒
大鼠毒蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)elisa檢測試劑盒
細胞血紅素氧合酶-2（HEME OXYGENASE-2）活性熒光定量檢測試劑盒
人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)elisa分析檢測試劑盒
艾滋病病毒EP1抗體
HIVEP1
芳香乙酰胺脫乙?；笜拥鞍?span>4抗體
AADACL4
大鼠腦鈉肽前體N末端片段(NT-proBNP)elisa檢測試劑盒
線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）
髓過氧化物酶MPO測試盒 100管/48樣 比色法
通用型鴨腸炎沙門氏菌（SE）基因檢測試劑盒
木瓜酶抗體
Papain
鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體
Calneuron 1
凋亡相關(guān)蛋白5抗體 Anti-TFAR19/PDCD5
原鈣粘蛋白β7抗體 Anti-PCDHB7
早老素蛋白-2抗體 Anti-presenilin 2/PS-2
多重表皮生長因子樣蛋白4抗體 Anti-Slit1/MEGF4
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗兔IgM
兔心臟微血管內(nèi)皮細胞Mouse Anti-Rabbit IgM / AP
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)接頭蛋白2抗體
KIAA1495; Leucine-rich repeat and calponin homology domain-containing protein 2; LRCH2; LRCH2_HUMAN.
兔胸腺上皮細胞
兔胰腺導(dǎo)管上皮細胞
ZR-75-30人乳腺癌細胞
HEY A8人卵巢癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。