培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔牙齦成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
牙齦
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2234
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔牙齦成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介：
兔牙齦成纖維細胞分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
實驗室分離的兔牙齦成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔牙齦成纖維細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
冰凍切片組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
植物維生素D(VD)elisa分析檢測試劑盒
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)elisa檢測試劑盒免費代測
線蟲乙烷亞（ENU）誘導(dǎo)突變試劑盒
豚鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)elisa分析檢測試劑盒
小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa檢測試劑盒
大鼠多巴胺D2受體配體(D2RL)elisa檢測試劑盒
體外非細胞系統(tǒng)血紅素氧合酶-2（HEME OXYGENASE-2）活性熒光定量檢測試劑盒
人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)elisa分析檢測試劑盒
腺相關(guān)病毒5 VP1抗體 AAV5 capsid protein VP1
鋅指蛋白182抗體 ZNF182
白細胞介素31抗體 IL-31
苯甲酸肽水解酶抗體 MEP1A/Meprin alpha
c-fos抗體 c-fos
DHX36蛋白抗體 DHX36
磷酸化p21激活激酶6抗體 Phospho-PAK6 (Ser560)
磷酸化蛋白激酶JAK-2抗體 phospho-JAK2 (Tyr1007+Tyr1008)
轉(zhuǎn)錄激活蛋白PURB單克隆抗體 PURB
轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 TRIM28
過氧化物酶HAO2抗體 HAO2
核受體RXRα重組兔單克隆抗體 Retinoid X Receptor alpha
NCAM1單克隆抗體 CD56
NXT2蛋白抗體 NXT2
乳腺癌易感基因2相互作用蛋白抗體 CNTROB
神經(jīng)元，肌肉特異性烯醇化酶抗體 ENO1+ENO2+ENO3
人兒茶酚胺（CA）elisa檢測試劑盒
兔牙齦成纖維細胞組織PKCι激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)elisa檢測試劑盒
NAD dependent deacetylase sirtuin 7; NAD-dependent deacetylase sirtuin-7; Silent mating type information regulation 2 homolog; Silent mating type information regulation 2 S.cerevisiae homolog 7; SIR2 L7; SIR2 like protein 7; Sir2 related protein type 7; SIR2, S.CEREVISIAE, HOMOLOG-LIKE 7; SIR2-like protein 7; SIR2L 7; SIR2L7; SIRT 7; SIR7_HUMAN; Sirtuin 7; Sirtuin type 7; Sirtuin7.
兔牙齦上皮細胞
兔牙周膜干細胞
人少突膠質(zhì)細胞；MO3.13
(STR)
HFL1（人胚肺成纖維細胞）
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。