產(chǎn)品名稱
兔胰腺星狀細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
胰腺組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2101
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細(xì)胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達(dá)Desmin蛋白，活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（alpha-SMA）。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色，陽(yáng)性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽(yáng)性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn)，原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見(jiàn)明顯的脂滴，傳代后，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。細(xì)胞化學(xué)染色顯示，細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin，48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)和傳代次數(shù)的增加，細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA，而不再表達(dá)Desmin，說(shuō)明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動(dòng)了激活過(guò)程，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活，傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時(shí)，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量**及不規(guī)則沉積。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰腺星狀細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔胰腺星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA、Desmin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源趨化因子(MDC)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa檢測(cè)試劑盒
牛白介素8(IL-8)elisa檢測(cè)試劑盒
體液?jiǎn)伟费趸?span>A型（MAO－A）活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)elisa檢測(cè)試劑盒
植物β1，3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
EPB41L4A蛋白抗體 EPB41L4A
FAM26E蛋白抗體 FAM26E
磷酸化外紡錘體極樣蛋白1抗體 phospho-Separase (Ser1073)
磷酸化整合素β1（CD29）抗體 phospho-Integrin beta 1 (Tyr783)
促卵泡刺受體抗體 FSH receptor
蛋白激酶A2抗體 AKAP2/PALM2
鋅指蛋白449抗體 ZNF449
鋅指蛋白787抗體 ZNF787
PE標(biāo)記人CD11c單克隆抗體 human CD11c/PE
PHD指蛋白21A抗體 PHF21A
視黃醛結(jié)合蛋白1抗體 RLBP1L1
瞬時(shí)受體電位蛋白12抗體 TRP12/TRPV4
環(huán)指蛋白31抗體 RNF31
肌漿/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶2抗體 Serca2/SERCA2 ATPase
組蛋白H1.2重組兔單克隆抗體 Histone H1.2
19號(hào)染色體開放閱讀框61抗體 C19orf61
載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
兔胰腺星狀細(xì)胞甲醛固定組織蛋白提取試劑盒50T
咖啡甘素（dulcin）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
Pectinesterase/pectinesterase inhibitor 18; AtPMEpcrA; Contains: Pectinesterase inhibitor 18; Pectin methylesterase inhibitor 18; Contains: Bifunctional pectinesterase 18/rRNA N-glycosylase; PE 18; Pectin methylesterase 18; Pectin methylesterase 4; AtPME4. 黑曲霉果膠酶；
兔真皮毛細(xì)胞
兔嗅鞘細(xì)胞
AtT-20小鼠垂體瘤細(xì)胞
HL 60（hl-60）人早幼粒白血病細(xì)胞