產(chǎn)品名稱
小鼠附睪上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
附睪
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1888
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠附睪上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳吒?吒
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠附睪上皮細(xì)胞分離自附睪組織；附睪（Epididymis）是一個(gè)由曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官，一端接著輸精管（Ductusdeferens），一端接著睪丸（Testis）的曲細(xì)精管，具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣，可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進(jìn)入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)精子的功能，以促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存精子，促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動(dòng)能力，總共停留8～17天，終達(dá)到功能上的成熟。在這個(gè)過程中，精子除了自身的因素，還受到附睪微環(huán)境的影響，這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變?？梢哉f，附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常，精子則不能成熟，引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞?；?xì)胞，其頂部離附睪管腔有一定距離，在附睪各部分，其形態(tài)沒有差別，一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞；另一種主細(xì)胞，是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ)，在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大，這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細(xì)胞外，附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化，附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮，而尾部平滑肌就沒有這種特點(diǎn)，僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮。作為負(fù)責(zé)提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪，具有活躍的分泌與吸收功能。其中，附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn)，對(duì)保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度，為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液，如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液，而從附睪排出的只不過幾百微升，也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，結(jié)扎輸精管時(shí)睪丸不會(huì)腫脹，但若結(jié)扎睪丸輸出小管，睪丸天就會(huì)腫脹，這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能，但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對(duì)精子的發(fā)育、成熟，不孕不育，附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠附睪上皮細(xì)胞采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠附睪上皮細(xì)胞經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
ColⅣELISAKIT
Hermansky-Pudlak綜合征蛋白3抗體
HPS3
細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體
APC6
魚褪黑素(MT)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞甘油二脂酰激酶（DAG KINASE）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)elisa分析檢測(cè)試劑盒
MAP7D3蛋白抗體
MAP7D3
橋粒糖蛋白4抗體
Desmocollin 4
沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 Anti-SIRT1
鳥嘌呤核苷酸交換因子抗體 Anti-RCBTB1/CLLD7
核仁蛋白C23抗體 Anti-Nucleolin/C23
信號(hào)通路Wnt5a抗體 Anti-WNT5A
TIP30蛋白抗體
TIP30
死亡因子4樣蛋白2抗體
Mortality Factor 4 like 2
脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體 Anti-SH3TC2
修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體 Anti-PTCHD3
親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體 Anti-PPIG
干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體 Anti-TROVE-2/SSA2
FITC標(biāo)記小鼠IgG（型對(duì)照)
小鼠附睪上皮細(xì)胞Mouse IgG / FITC
糖基轉(zhuǎn)移酶樣1抗體
Interleukin-12 receptor subunit beta-1; IL12RB1; IL-12RB1; CD212; IL-12R-BETA1; IL12RB; MGC34454; IL-12 receptor beta component; interleukin-12 receptor beta-1 chain; IL-12RB1; IL-12R-beta-1; IL-12R subunit beta-1; IL-12 receptor subunit beta-1; I12R1_MOUSE.
小鼠腹膜間皮細(xì)胞
兔小腸成纖維細(xì)胞
G422小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞
HRGEC（人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞）