
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腹腔巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腹腔液
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
巨噬細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1586
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 利多卡因(12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離自腹腔;腹腔,即軀干腹部的腔,內(nèi)襯腹膜,由體壁、橫膈膜和盆底圍成,其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細(xì)胞屬細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞和分子學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活球或其他細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一;腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬、和分泌作用都十分活躍,有重要防御功能。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)elisa分析檢測試劑盒
LHX3蛋白抗體
LHX3
腦組織表達(dá)X連鎖蛋白1抗體
Bex1
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)elisa檢測試劑盒
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)elisa檢測試劑盒
組織CDK6/CYC D1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
人骨形成蛋白7(BMP7)elisa檢測試劑盒
NOC2家族樣蛋白抗體
NOC2L
9號染色體開放閱讀框135抗體
C9orf135
白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體 Anti-TIRAP
6磷酸果糖激酶2抗體 Anti-PFK2/PFKFB3
磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗體 Anti-PIK3 gamma
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體 Anti-SorLA/LRP9
色氨酸2,3雙加氧酶抗體
TDO2/tryptophan 2,3-dioxyase
DPS1蛋白抗體
DPS1
WEE1蛋白抗體 Anti-WEE1 protein
核酪蛋白激酶和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶底物1抗體 Anti-NUCKS1
環(huán)指蛋白23抗體 Anti-RNF23
SLFNL1抗體 Anti-SLFNL1
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)elisa分析檢測試劑盒
小鼠腹腔巨噬細(xì)胞BACE2 ELISA Kit
人黑色素瘤活性抑制蛋白(MIA)elisa分析檢測試劑盒
EPK 2; EPK2; EPK-2; nPKC nu; nPKCnu; nu; PKCnu; PKC nu; PKD 3; PKD3; PRK D3; PRKCN; PRKD 3; PRKD3; Protein kinase C; Protein kinase C nu; Protein kinase C nu type; Protein kinase D3; Protein kinase EPK 2; Protein kinase EPK2; Serine threonine protein kinase; Serine/threonine protein kinase D3.
小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
兔下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞
GC-2 SPd(ts)小鼠精母細(xì)胞系
Hs 414.T人纖維肉瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。