細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞分離自睪丸組織；睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細(xì)胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1～2個(gè)核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。從青春期開始，睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺（黃體**素）的作用，能合成分泌雄性，可促進(jìn)精子的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持性征和性功能。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號(hào) |
用途 |
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睪丸 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1881 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞經(jīng)3β-HSD熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動(dòng)物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡(jiǎn)單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺(tái)使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時(shí)能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個(gè)無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時(shí)，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個(gè)細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個(gè)細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時(shí)可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時(shí)間根據(jù)正常細(xì)胞消化時(shí)間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個(gè)細(xì)胞時(shí)候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會(huì)再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時(shí)候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
酵母P型ATP酶（P type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠αACTIN基因甲基化檢測(cè)試劑盒
牛α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa檢測(cè)試劑盒
異亮氨酸含量測(cè)試盒
小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠游離睪酮(F-TESTO)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠饑餓(GHRL)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞ROCK-I激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)elisa分析檢測(cè)試劑盒
原鈣粘蛋白γA3抗體 PCDHGA3
粘蛋白4抗體 MUC4
分泌性蛋白RSPO1抗體 RSPO1
富含脯氨酸蛋白20A抗體 PRR20
G蛋白偶聯(lián)受體激酶4抗體 GRK4
HS2ST1蛋白抗體 HS2ST1
凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體 Thrombomodulin
前B細(xì)胞蛋白3抗體 VPREB3
AF750標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體 NEUROD1, Alexa Fluor 750 conjugated
APC標(biāo)記人CD28單克隆抗體 human CD28/APC
聚合酶δ相互作用蛋白2抗體 POLDIP2
可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1單克隆抗體 sFlt1
TP53調(diào)節(jié)激酶抗體 PRPK
WDR68蛋白抗體 WDR68
微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白2抗體 RMD2
細(xì)胞角蛋白7重組兔單克隆抗體 CK-7
小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞食物乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
超氧化物歧化酶（SOD）亞型制備試劑盒
Adipose tissue specific secretory factor; ADSF; C/EBP epsilon regulated myeloid specific secreted cysteine rich protein; C/EBP epsilon regulated myeloid specific secreted cysteine rich protein precursor 1; Cysteine rich secreted protein A12 alpha like 2; Cysteine rich secreted protein FIZZ3; FIZZ 3; FIZZ3; Found in inflammatory zone 3; HXCP 1; HXCP1; MGC126603; MGC126609; PRO1199; Resistin delta2; RETN 1; RETN; RETN1; RSTN; UNQ407; XCP 1; XCP1
小鼠睪丸支持細(xì)胞
兔胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
HC11小鼠乳腺上皮細(xì)胞
Hs 888.T人骨肉瘤細(xì)胞