產(chǎn)品名稱
小鼠睪丸支持細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
睪丸組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1868
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠睪丸支持細(xì)胞分離自睪丸；睪丸支持細(xì)胞又稱Sertoli細(xì)胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細(xì)胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細(xì)胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄結(jié)合蛋白，為其提供高濃度的雄環(huán)境等，還具有構(gòu)成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)精子發(fā)生等功能。睪丸支持細(xì)胞是睪丸的主要組成細(xì)胞，能分泌多種生長因子和抑制因子，不僅可為精子提供營養(yǎng)支持和保護(hù)，也能對其他細(xì)胞，如胰島和神經(jīng)細(xì)胞提供營養(yǎng)支持，而且當(dāng)其與胰島或神經(jīng)細(xì)胞共移植時，也能夠為這些細(xì)胞提供保護(hù)，提高植活率。因此，睪丸支持細(xì)胞在細(xì)胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價值，而且在精子發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠睪丸支持細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠睪丸支持細(xì)胞經(jīng)Fas-L熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa檢測試劑盒
人S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞PKCε激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)elisa分析檢測試劑盒
大鼠肌鈣蛋白C(TNC)elisa檢測試劑盒
小鼠神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)elisa檢測試劑盒
大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa檢測試劑盒
組織PKG-Iα激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
人肌球蛋白(MYS)elisa分析檢測試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體141抗體 GPCR GPR141
G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 GPATCH4
內(nèi)臟移位線管蛋白CFC1蛋白抗體 CFC1
胚胎干細(xì)胞RAS蛋白抗體 ERAS
芳基硫酸酯酶B抗體 ARSB
附睪蛋白3A抗體 EDDM3A
胰島素樣肽3抗體 DILP3
抑制因子DKK4抗體 DKK4
S-tag標(biāo)簽抗體 S-tag
TRIM50蛋白抗體 TRIM50
突觸相關(guān)蛋白29抗體 SNAP29
微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶2抗體 MGST2
緊密連接蛋白7重組兔單克隆抗體 CLDN7
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體 CCDC139
9號染色體開放閱讀框61抗體 C9orf61
alpha 1腎上腺素能受體B抗體 ADRA1B
大鼠FMS樣激酶3(Flt3)elisa分析檢測試劑盒
小鼠睪丸支持細(xì)胞小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測試劑盒
過氧化氫酶elisa檢測試劑盒免費代測
Alpha synuclein; Beta synuclein; NACP; Non A beta component of AD amyloid; Non A4 component of amyloid precursor; PARK1; PARK4; Parkinson disease familial 1; PD1; SNCA; SYUA_HUMAN; SNCB; SNCB protein; Synuclein alpha; Synuclein beta; SYUB_HUMAN.
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
兔胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
HEPA1-6+LUC小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
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