培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腦膜細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦膜組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1946
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠腦膜細(xì)胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腦膜細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠腦膜細(xì)胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
超微量總ATP酶測試盒測組織、普通細(xì)胞 50管/25樣 100管/50樣 比色法
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP-14)elisa檢測試劑盒免費代測
植物核蛋白/細(xì)胞器蛋白提取試劑盒100T
人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)elisa分析檢測試劑盒
純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pGEFP-RUNX3）
魚熱休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)elisa檢測試劑盒
大鼠利鈉肽受體1(NPR1)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞短鏈羥脂酰脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒
石斑魚卵黃蛋白原(VTG)elisa分析檢測試劑盒
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白8抗體 CtIP
絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體 SRRM3
PCID1蛋白抗體 PCID1
PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD57單克隆抗體 human CD57/PerCP-Cy5.5
組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 SUV39H1
11號染色體開放閱讀框65抗體 C11orf65
褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體 AGRP
環(huán)指蛋白142抗體 RNF142
鋅指蛋白775抗體 ZNF775
信號通路Wnt3a抗體 Wnt3a
程序性死亡配體2（CD273）單克隆抗體 PDCD1LG2
單極紡錘體蛋白激酶1抗體 TTK
EHD2蛋白抗體 EHD2
FAM118B蛋白抗體 FAM118B
磷酸化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4抗體 Phospho-NCF4 (Thr154)
磷脂爭奪酶1抗體 Scramblase 1
組織基質(zhì)金屬（MMP-13）活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠腦膜細(xì)胞人α乳清蛋白(α-La)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素22受體α2(IL2Rα2)elisa檢測試劑盒
ALPS 2; ALPS2; Apoptosis related cysteine peptidase; Apoptotic protease Mch 4; CASP 10; CASP10; CASP10 protein; Caspase 10 apoptosis related cysteine peptidase; Caspase 10 apoptosis related cysteine protease; Caspase10; FADD Like Ice 2; Fas Associated Death Domain Protein; FAS associated death domain protein interleukin 1B converting enzyme 2; FLICE 2; FLICE2; ICE Like Apoptotic Protease 4; Interleukin 1B Converting Enzyme 2; MCH 4; MCH4.
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
兔少突膠質(zhì)細(xì)胞
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。