
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腎組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1835
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有功能,**腎素、促紅細(xì)胞**素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾**原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動(dòng)脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進(jìn)行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞是一類特殊微血管類型的細(xì)胞。細(xì)胞為圓形、多角形,單層貼壁生長;細(xì)胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細(xì)胞被覆于腎小球壁腔側(cè),與血流直接接觸,是腎小球?yàn)V過膜的道屏障,可粘附和白細(xì)胞,修復(fù)基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細(xì)胞在學(xué)和病理生理學(xué)領(lǐng)域中具有重要的研究價(jià)值。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞采用先機(jī)械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
通用型HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒定性檢測試劑盒
MARVEL蛋白家族D2抗體
MARVELD2
橋粒芯糖蛋白4抗體
Desmoglein 4
魚5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)elisa分析檢測試劑盒
大鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞人體腺病毒(adenovirus)定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶(NOS3)elisa檢測試劑盒
原鈣粘蛋白β7抗體
PCDHB7
艾滋病病毒Nef抗體
HIV1 Nef
磷酸化羥化酶抗體 Anti-Phospho-TH (Ser31)
絲裂原活化蛋白激酶p38α抗體 Anti-p38MAPK/MAPK14/p38Alpha
過氧化酶活化受體γ2抗體 Anti-PPAR gamma 2
突觸相關(guān)蛋白29抗體 Anti-SNAP29
Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / Cy7
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體
phospho-ATG4A (Ser100)
鋅指蛋白23抗體 Anti-ZNF23
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek3抗體 Anti-NEK3
乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體 Anti-RAD51C
溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體 Anti-SLC44A1/CD92
大鼠B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa分析檢測試劑盒
小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Rat NFKBIE ELISA Kit
人肝素-血小板因子4復(fù)合物抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒
Antigen CD121a; CD121 antigen-like family member A; CD121A; CD121a antigen; D2S1473; IL 1; IL 1R 1; IL 1R alpha; IL 1RT1; IL-1R-1; IL-1R-alpha; IL-1RT-1; IL-1RT1; IL1 inhibitor; IL1R; IL1R1; IL1R1_HUMAN; IL1RA; IL1RN; IL1RT1; Interleukin 1 receptor alpha type 1; Interleukin 1 receptor antagonist protein (IRAP); Interleukin 1 receptor type I; Interleukin receptor 1; Interleukin-1 receptor alpha; Interleukin-1 receptor type 1; Interleukin-1 receptor type I; P80; IL1 Receptor I; IL-1 Receptor I; Interleukin-1 receptor type 1, soluble form; IL-1 sRI.
小鼠腎小球系膜細(xì)胞
兔膀胱上皮細(xì)胞
BRL-3A大鼠肝細(xì)胞
K562人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。