培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠食管上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
食管組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1799
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
小鼠食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠食管上皮細胞采用機械分離法結(jié)合組織貼塊法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠食管上皮細胞經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）elisa檢測試劑盒
小鼠白細胞介素3(IL-3)elisa檢測試劑盒
倉鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織CYTOCHROME C蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
牛血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)elisa分析檢測試劑盒
魚Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa分析檢測試劑盒
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)elisa檢測試劑盒
組織人體腺病毒（adenovirus）定量PCR擴增檢測試劑盒
豚鼠內(nèi)皮素1(EDN1)elisa檢測試劑盒
20號染色體開放閱讀框117抗體 C20orf117
3號染色體開放閱讀框58抗體 C3orf58
肌球蛋白5A抗體 MYO5A
激活素A受體1B抗體 ACVR1B
PRDM鋅指轉(zhuǎn)錄因子PRDM13抗體 PRDM13
ras癌基因家族RAB20單克隆抗體 RAB20
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶16抗體 STK16
絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 MEK7
FER1L5蛋白抗體 FER1L5
FITC標記小鼠CD69單克隆抗體 mouse CD69/FITC
磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 PIK3CA
毛細管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 CMG1
蛋白酶調(diào)解因子7抗體 PSMD7
凋亡相關(guān)蛋白7抗體 PDCD7
信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體 SIPA1
氧化還原酶NDOR1抗體 NDOR1
大鼠載脂蛋白B48(Apo B48)elisa檢測試劑盒
小鼠食管上皮細胞動物組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
豚鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)elisa檢測試劑盒
60S acidic ribosomal protein P1; p32; p34; REPA2; Replication factor A protein 2; Replication protein A 32 kDa subunit; Replication protein A 32kDa subunit; Replication protein A 34 kDa subunit; Replication protein A; Replication Protein A2 (32kDa); Replication protein A2; Replication protein A2, 32kDa; RF-A protein 2; Rf-A2; RFA; RFA2_HUMAN; RP-A p32; RP-A p34; RP21C; RPA 2; RPA 32; RPA; Rpa2; RPA32; RPA34; RpLP1; RpP2.
小鼠視網(wǎng)膜前體細胞
兔內(nèi)皮祖細胞
H9C2大鼠心肌細胞
KASUMI-1人紅白血病細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。