
產(chǎn)品名稱
小鼠真皮毛細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
皮膚組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1906
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠真皮毛細(xì)胞分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮(毛)外,毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來。真皮毛細(xì)胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細(xì)胞。在毛囊發(fā)育早期,真皮細(xì)胞向單層上皮細(xì)胞發(fā)出真皮信號,刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細(xì)胞向下方的真皮發(fā)出表皮信號,誘導(dǎo)其形成有成纖維細(xì)胞組成的凝集細(xì)胞團(tuán)。在此過程中,毛母質(zhì)細(xì)胞逐漸包裹凝集細(xì)胞團(tuán),形成成熟的真皮毛細(xì)胞。作為毛囊中的重要細(xì)胞群,真皮毛細(xì)胞的分子機(jī)制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認(rèn)識和解析。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛細(xì)胞經(jīng)層粘連蛋白熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品:
MousealbuminELISAKit
魚雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒
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豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
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鋅指蛋白471抗體 Anti-ZNF471
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SGEF
脂質(zhì)磷酸磷酸酶相關(guān)蛋白3抗體
LPPR3
5-羥色胺受體2C抗體 Anti-5HTR2C
腺苷酸硫酸激酶1抗體 Anti-PAPSS1
多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4 Anti-PARP4
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 Anti-phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355)
羊抗雞IgG H&L抗血清
小鼠真皮毛細(xì)胞Goat Anti-Chicken IgG H&L whole serum
麥角蛋白抗體
CCT8L2; KCNMB3L; T complex protein 1; CESK1; chaperonin containing TCP1, subunit 8 (theta)-like 2; Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 2; T complex protein 1; chaperonin containing TCP1, subunit 8 theta-like 2; TCPQM_HUMAN.
小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞
兔結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞
大鼠乳腺癌細(xì)胞;MADB106
KYSE-410人食道鱗狀細(xì)胞癌