產(chǎn)品名稱
大鼠耳軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
耳組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭狀
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1673
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳組織。
2) 細(xì)胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭狀，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)試劑。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
彈性軟骨僅存在高等動(dòng)物外耳廓、聽道、會(huì)咽等處。與其它軟骨相比，間質(zhì)中含有大量交織成網(wǎng)的彈性纖維，成網(wǎng)狀在軟骨內(nèi)排列，同時(shí)含有少量膠原纖維。目前，彈性軟骨大多被用于修復(fù)人類殘缺及畸形耳廓及其它美容修復(fù)。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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RSPO4蛋白抗體 RSPO4
SH3RF3蛋白抗體 SH3RF3
8號(hào)染色體開放閱讀框84抗體 C8orf84
AF594標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體 PAX6, Alexa Fluor 594 conjugated
鉀離子通道蛋白家族成員2抗體 KCNE2
角蛋白相關(guān)蛋白KAP27.1抗體 KAP27.1
乙酰化化組蛋白H2B (Lys116)抗體 Histone H2B (Acetyl K116)
應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1重組兔單克隆抗體 STIP1
二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 CRMP5
防凍蛋白IV型 (Danio rerio) 抗體 AFP4b
GRAMD1C蛋白抗體 GRAMD1C
G蛋白偶聯(lián)受體183抗體 GPR183
囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B VAPB
浦肯野細(xì)胞相關(guān)蛋白1抗體 Puratrophin 1
體液HHV6（HUMAN HERPESVIRUS 6）病毒
大鼠耳軟骨細(xì)胞Chicken IgM / Cy3
雌二醇單克隆抗體
26S proteasome non ATPase regulatory subunit 8; 26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 8; 26S proteasome regulatory subunit p31; 26S proteasome regulatory subunit RPN12; 26S proteasome regulatory subunit S14; AAV38494; HIP6; HYPF; MGC1660; Nin1p; P31; Proteasome (prosome macropain) 26S subunit non ATPase 8; PSMD8; PSMD8_HUMAN; Rpn12; S14.
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兔海馬神經(jīng)干細(xì)胞
PK-13豬腎細(xì)胞系
LN229人膠質(zhì)瘤細(xì)胞