培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠肺巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肺組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
圓形
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1525
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常肺組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD68或MAC387熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：圓形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代巨噬 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
肺巨噬細(xì)胞由單核細(xì)胞分化而來，廣泛分布在肺間質(zhì)內(nèi)，在細(xì)支氣管以下的管道周圍和肺泡隔內(nèi)較多。肺巨噬細(xì)胞的吞噬、和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。吸入空氣中的塵粒、等異物進(jìn)入肺泡和肺間質(zhì)，多被巨噬細(xì)胞吞噬，故細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)常見塵粒、等物進(jìn)入肺泡和肺間質(zhì)，多被巨噬細(xì)胞吞噬，故細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)常見塵粒、次級溶酶體及吞噬體等。
肺巨噬細(xì)胞還可吞噬衰老的紅細(xì)胞，在心力衰竭患者出現(xiàn)肺瘀血時(shí)，大量紅細(xì)胞從溢出，被巨噬細(xì)胞吞噬。吞噬異物的巨噬細(xì)胞，有的從肺泡腔經(jīng)呼吸道粘液流動(dòng)和纖毛運(yùn)動(dòng)而被咳出，有的進(jìn)入肺管隨進(jìn)入肺結(jié)內(nèi)。
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酪蛋白激酶δ1抗體
CSNK1D
染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體 Anti-SUPT16H/CDC68
肌肉糖原磷酸化酶抗體 Anti-PYGM
磷脂酰肌醇激酶抗體 Anti-PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit
辣椒素受體抗體 Anti-TRPV1/VR1
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FAM118A蛋白抗體
Glutathione synthase; GSH S; GSH synthetase; GSH-S; GSHB_HUMAN; GSHS; GSS; MGC14098; OTTHUMP00000030711.
大鼠肺巨噬細(xì)胞
兔冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞
LN-229人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。