細(xì)胞簡(jiǎn)介：
角質(zhì)形成細(xì)胞是一種不斷分化的復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞，其分化的終階是形成角蛋白。根據(jù)角質(zhì)形成細(xì)胞的發(fā)展階段和特點(diǎn)，從內(nèi)向外可將其分為五層?；准?xì)胞層又稱層，棘細(xì)胞層，顆粒層，透明層，角質(zhì)層。
角質(zhì)形成細(xì)胞的分化成熟表現(xiàn)為從基底層到向角質(zhì)層的逐漸移行。在單一移行過程中，角質(zhì)形成 ; 細(xì)胞的形狀和功能也逐漸發(fā)生著變化，從單層柱狀上皮的基底層到扁平的細(xì)胞核消失的角質(zhì)層。新生的基底細(xì)胞進(jìn)入棘細(xì)胞層，然后上移到顆粒層的上層。
|
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號(hào) |
用途 |
|
皮膚組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1656 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞特性：
1） 細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常皮膚組織。
2) 細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白 ((Pan Cytokeratin) 熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于 90% 。
4) 不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 角質(zhì)形成 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動(dòng)物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡(jiǎn)單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺(tái)使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時(shí)能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個(gè)無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時(shí)，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個(gè)細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個(gè)細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時(shí)可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時(shí)間根據(jù)正常細(xì)胞消化時(shí)間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個(gè)細(xì)胞時(shí)候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會(huì)再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時(shí)候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織PAR1Bα激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶1抗體
MAN1B1
17號(hào)染色體開放閱讀框77抗體
C17orf77
豚鼠球蛋白G(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
蛋氨肽酶（methionine aminopeptidase； aminopeptidase M）
體液總抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量檢測(cè)試劑盒
谷氨酰胺合成酶GS測(cè)試盒 50T/24樣 比色法
原鈣粘蛋白β11抗體
PCDHB11
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
CARD6
內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體 Anti-TEM1/CD248
蛋白酶活化受體4抗體 Anti-PAR4
磷酸化蛋白激酶Aβ抗體 Anti-phospho-PKA beta(Ser338)
神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白4抗體 Anti-Synaptogyrin 4
FITC標(biāo)記的兔抗牛IgG H&L
Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / FITC
EFCAB1蛋白抗體
EFCAB1
鋅指蛋白909抗體 Anti-ZBTB1/ZNF909
核孔糖蛋白P62抗體 Anti-Nucleoporin p62
維甲酸受體RAR α/RAR α抗體 Anti-RAR alpha
固醇酰輔酶A脫氫酶1抗體 Anti-SCD1
大鼠CD19分子(CD19)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠角質(zhì)形成細(xì)胞TRH ELISA KIT
人堿性磷酸酶(ALP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Cardiac tetrodotoxin insensitive voltage dependent sodium channel alpha subunit; CDCD2; CMD1E; CMPD2; HB1; HB2; HBBD; HH1; ICCD; IVF; LQT3; PFHB1; Scn5a (gene name); Scn5a; SCN5A_HUMAN; Sodium channel protein cardiac muscle alpha subunit; Sodium channel protein cardiac muscle alpha-subunit; Sodium channel protein cardiac muscle subunit alpha; Sodium channel protein type 5 subunit alpha; Sodium channel protein type V alpha subunit; Sodium channel protein type V subunit alpha; SSS1; VF1; Voltage gated sodium channel alpha subunit Nav1.5; Voltage-gated sodium channel alpha subunit Nav1.5; Voltage-gated sodium channel subunit alpha Nav1.5.
大鼠角質(zhì)形成細(xì)胞
兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞
CT26+LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
LX-2+GFP人肝星形細(xì)胞+GFP