培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
眼球。
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1728
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的眼球。
2)細(xì)胞鑒定：結(jié)蛋白（Desmin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：長梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
結(jié)膜松弛癥（ conjunctivochalasis，CCh）是由于球結(jié)膜過度松弛和（或）下瞼緣張力高，造成松弛球結(jié)膜堆積在眼球與下瞼緣、內(nèi)外眥部之間，形成皺褶，引起眼表淚液分布異常，并伴有眼部不適如流淚、干澀、異物感等癥狀的眼病。有研究表明結(jié)膜松弛癥中結(jié)膜成纖維細(xì)胞的改變，影響細(xì)胞外基質(zhì)成分的平衡狀態(tài)和穩(wěn)定性，可能是結(jié)膜松弛癥發(fā)生的原因。
公司正在出售的產(chǎn)品：
磷脂酶C（Phospholipase C）活性比色法定量檢測試劑盒
KIAA1614蛋白抗體
KIAA1614
ATP5E蛋白抗體
ATP5E
大鼠三葉因子2(TFF2)elisa檢測試劑盒
蛋白硝基化染色測定試劑盒
豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)elisa檢測試劑盒
GST融合蛋白位素（[γ32P]GTP）激酶標(biāo)記試劑盒
NBPF6蛋白抗體
NBPF6
5號染色體開放閱讀框36抗體
C5orf36
T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原1抗體 Anti-TALLA-1/CD231
源盒蛋白HOXB13抗體 Anti-PSGD/HOXB13
泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體 Anti-OTUB
磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3 Anti-Phospho-SRC-3 (Thr24)
膠原蛋白9抗體
Colla IX
DMRT1蛋白抗體
DMRT1
粘著斑蛋白抗體 Anti-Vinculin
NYS48蛋白抗體 Anti-NYS48
RAP1GAP酶激活蛋白抗體 Anti-RAP1GAP
環(huán)指蛋白22抗體 Anti-TRIM3/RNF22
大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)elisa分析檢測試劑盒
大鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Rat IgM / PE
FAM50B蛋白抗體
DGAT2_HUMAN; Diacylglycerol O acyltransferase like protein 2; Diacylglycerol O-acyltransferase 2; Diacylglycerol O-acyltransferase homolog 2 (mouse); Diacylglycerol O-acyltransferase homolog 2; Diacylglycerol O-acyltransferase-like protein 2 isoform 1; Diglyceride acyltransferase 2; DKFZp686A15125; GS1999full; HMFN1045.
大鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
DI TNC1大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞
M14人黑色素瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。