
細胞簡介:

腦血管是由內(nèi)膜、中層彈力層和外膜構(gòu)成,三層緊密貼合在一起。其中,外膜是專門的支持組織,由結(jié)締組織組成,主要成分是成纖維細胞,其在血管炎癥反應(yīng)、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
腦組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1711 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2) 細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當(dāng)單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人CD68分子(CD68)elisa檢測試劑盒
大鼠牙本質(zhì)磷蛋白(DPP)elisa檢測試劑盒
載玻片細胞PARP蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
小鼠I型膠原(Col I)elisa檢測試劑盒
/酵母細胞總RNA分離試劑盒
人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)elisa分析檢測試劑盒
動物組織S9組分分離試劑盒
植物L-抗壞血酸過氧化物酶3,過氧化物酶病(APX3)elisa檢測試劑盒
大鼠維生素D(VD)elisa檢測試劑盒
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體 AER61
細胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體 ARP3
Src激活和信號分子蛋白抗體 TOM1L1
TRIM37蛋白抗體 TRIM37
AF680標(biāo)記的軟骨蛋白聚糖抗體 ADAMTS5, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標(biāo)記的煙堿型乙酰膽堿受體α7抗體 CHRNA7, Alexa Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白22抗體 Claudin 22
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體 CCDC120
原鈣粘蛋白γ10抗體 PCDHGA10
粘蛋白-1抗體 MUC1
分泌型白細胞蛋白酶抑制因子抗體 SLPI
富含脯氨酸蛋白11抗體 PRR11
G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體 G gamma12
HRP標(biāo)記的程序性死亡配體1抗體 PD-L1, HRP conjugated
凝血酶(凝血因子II)輕鏈抗體 Thrombin light chain
染色體脆弱性相關(guān)基因抗體 ATAD5
細胞色素P450亞酶2B6(BUPROPION)活性高效液相色譜法(HPLC)定量檢測試劑盒
大鼠腦血管成纖維細胞Goat Anti-Human IgG H&L / APC
G氨基丁酸A型受體α4/GABAA Rα4抗體
GALNAC T1; GalNAc transferase 1; GalNAc-T1; GALNT 1; GALNT1; GALT1_HUMAN; Polypeptide GalNAc transferase 1; Polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 1; Polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 1 soluble form; pp GaNTase 1; pp-GaNTase 1; Protein UDP acetylgalactosaminyltransferase 1; Protein-UDP acetylgalactosaminyltransferase 1; UDP GalNAc:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 1; UDP N acetyl alpha D galactosamine:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 1 (GalNAc T1); UDP N acetyl alpha D galactosamine:polypeptide N acetylgalactosaminyltransferase 1; UDP-GalNAc:polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 1.
大鼠腦血管成纖維細胞
兔膽囊上皮細胞
HGC-27+YFP人胃癌細胞黃色熒光標(biāo)記
MCAS人卵巢癌細胞