
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠前列腺基底細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
前列腺組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
不規(guī)則細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1599
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常前列腺組織。
2) 細胞鑒定:肌上皮標記物(P63)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 基底 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
細胞簡介:
前列腺位于膀胱頸下方,包繞著膀胱口與尿道結(jié)合部位。
前列腺腺體主要由 3種細胞構(gòu)成,即分泌細胞、基底細胞和神經(jīng)細胞。基底細胞約占前列腺細胞總數(shù)的10%,不具有分泌功能,被認為是前列腺的多潛能干細胞。
前列腺基底細胞是前列腺固有腺體中在分泌上皮和基底膜之間單層排列的一層細胞,核小,缺乏胞質(zhì)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)elisa檢測試劑盒
人蛋白酶3(PR3)elisa分析檢測試劑盒
細胞磷酸甲羥戊酸激酶(phosphomevalonate kinase)活性
小鼠維生素B9(VB9)elisa檢測試劑盒
大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa檢測試劑盒
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa檢測試劑盒
防脫載玻片經(jīng)APES處理 50片
細胞NF KAPPA B P65蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
馬白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒
味覺2型受體蛋白家族49抗體 TAS2R49
細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 BIN3
src原癌基因單克隆抗體 SRC
TRIM43B蛋白抗體 TRIM43B
AF680標記的上皮細胞粘附分子(CD326)抗體 EpCAM, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標記的造血干細胞抗原CD133抗體 CD133, Alexa Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白2單克隆抗體 Claudin 2
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白126抗體 CCDC126
原鈣粘蛋白γA1抗體 PCDHGA1
粘蛋白20抗體 MUC20
分泌型磷脂酶A2亞基5抗體 Secretory phospholipase A2 Type V
富含脯氨酸蛋白18抗體 PRR18
G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體 G gamma4
HRP標記的人CD34單克隆抗體 CD34, HRP conjugated
凝血酶原酶/維介素抗體 FGL2
羥乙基淀粉抗體 Hydroxyethyk starch
大鼠促黃體 (LH)elisa檢測試劑盒
大鼠前列腺基底細胞Mouse Anti-Human IgG H&L / AP
FBXW5蛋白抗體
C15orf30; Chromosome 15 open reading frame 30; EC 2.4.2.30; FLJ25281; PAR16_HUMAN; PARP 16; PARP-16; Parp16; Poly (ADP ribose) polymerase family member 16; Poly [ADP ribose] polymerase 16; Poly [ADP-ribose] polymerase 16.
大鼠前列腺基底細胞
兔鼻腔粘膜上皮細胞
K1(GLAG-66)人甲狀腺癌細胞
MDA-MB-415人乳腺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。