
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠腎近端小管上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腎臟組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
鋪路石狀細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1604
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常腎臟組織。
2) 細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
細胞簡介:
腎單位是腎結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,由腎小體和腎小管組成。腎小管與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收和排泌作用 .腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu),分布位置和功能分成三部分;近端小管、髓袢和遠端小管。
近端小管在對腎小球超濾液中蛋白質(zhì)、 Na+、HCO3-、Cl-、K+、Ca2+、PO43-,水與有機溶質(zhì)(葡萄糖與氨基酸)的重吸收中發(fā)揮著重要作用,約1/2的超濾液在近端小管處重吸收。
公司正在出售的產(chǎn)品:
αHBDHELISAKit
羊白介素7(IL7)elisa分析檢測試劑盒
IL7 ELISA kit
人膀胱癌抗原(UBC)elisa分析檢測試劑盒
UBCELISAKit
還原糖含量測試盒
蜂蜜比色法定量檢測試劑盒
胚胎干細胞培養(yǎng)生長因子
大鼠乙醇脫氫酶(ADH)elisa檢測試劑盒
CD85g抗體
LILRA4/CD85g
Bax相互作用因子1抗體
Bif
磷酸化突觸結(jié)合蛋白1抗體 Anti-phospho-SYT1(Thr202)
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 Anti-RAGE
腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 Anti-NPHS2/Podocin
鋅指蛋白BED3抗體 Anti-ZBED3
鈉氫通道蛋白9家族A9抗體
SLC9A9
復(fù)合素4抗體
CPLX4
多配體聚糖結(jié)合蛋白2抗體 Anti-Syntenin 2
RNA聚合酶1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體 Anti-PTRF
P-鈣粘附分子抗體 Anti-P-cadherin
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 Anti-TORC1/CRTC1
抗體 / 型對照抗體
大鼠腎近端小管上皮細胞Goat Anti-Rat IgG H&L / AP
延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體
Inositol polyphosphate 5 phosphatase of 145kDa; 4; 5-trisphosphate 5-phosphatase 1; hp51CN; hSHIP; Inositol polyphosphate 5 phosphatase 145kDa; Inositol polyphosphate 5 phosphatase; Inositol polyphosphate 5 phosphatase D; Inositol polyphosphate-5-phosphatase of 145 kDa; INPP 5D; INPP5D; INPP5D protein; MGC104855; MGC142140; MGC142142; p150 ship; p150Ship; Phosphatidylinositol 3,4,5 trisphosphate 5 phosphatase 1; Phosphatidylinositol-3; SH2 containing inositol 5 phosphatase; SH2 containing inositol phosphatase isoform b; SH2 domain containing inositol 5' phosphatase 1; SH2 domain containing inositol phosphatase 1; SH2 domain-containing inositol phosphatase 1; SH2 domain-containing inositol-5''-phosphatase 1; SHIP 1; SHIP-1; SHIP1; SHIP1_HUMAN; Signaling inositol polyphosphate 5 phosphatase SIP 145; Signaling inositol polyphosphate 5 phosphatase SIP145; SIP 145; SIP-145; SIP145.
大鼠腎近端小管上皮細胞
人主動脈平滑肌細胞
LN229+LUC人膠質(zhì)瘤細胞熒光素酶標記
MDBK[NBL-1](牛腎細胞)
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。