
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
主動(dòng)脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1545
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)或血管假性血友病因子(vWF)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下,分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和**調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理,動(dòng)脈粥樣化等的發(fā)病機(jī)理以及發(fā)展新的方法。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CHATELISAkit
干擾素α21抗體
IFNA21
嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2抗體
BTN2A2
組織半胱-13(CASPASE-13)活性比色法定量檢測試劑盒
過氧化氫檢測試劑盒500T
測分型SODCu-Zn、Mn、總 100管/48樣 50管/24樣
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa檢測試劑盒
惡性纖維組織細(xì)胞瘤抗體
MFHA1/Malignant fibrous histiocytoma
脫氫肽酶1抗體
DPEP1
緊密連接蛋白2抗體 Anti-TJP2
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞特異性蛋白65抗體 Anti-RPE65
核受體輔助抑制因子1抗體 Anti-NCoR1
玻璃粘連蛋白抗體 Anti-VTN/Vitronectin
TRA2B蛋白抗體
TRA2B
線粒體核糖體蛋白L50抗體
MRPL50
14號染色體開放閱讀框174 Anti-SAMD15/C14orf174
泛素特異性蛋白酶OTB1抗體 Anti-OTUB1
磷酸化p21激活激酶2抗體 Anti-phospho-PAK2(Ser141)
跨膜絲氨酸蛋白酶5抗體 Anti-TMPRSS5
辣根過氧物酶標(biāo)記小鼠IgG
大鼠主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞Rabbit Anti-Rat IgG H&L / Cy7
FAM23A蛋白抗體
PARP 5a; PARP5A; PARPL; pART5; Poly [ADP-ribose] polymerase 5A; TANK 1; TANK1; Tankyrase 1; Tankyrase I; Tankyrase TRF1 interacting ankyrin related ADP ribose polymerase; Tankyrase-1; Tankyrase1; TankyraseI; TIN 1; TIN1; TINF 1; TINF1; TNKS 1; TNKS; TNKS-1; TNKS1; TNKS1_HUMAN; TRF1 interacting ankyrin related ADP ribose polymerase; TRF1-interacting ankyrin-related ADP-ribose polymerase.
大鼠主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞
人星形膠質(zhì)細(xì)胞
Y79人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞
MonoMac6人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。