培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔肝成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肝臟組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭狀
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2067
用途
僅供科研實驗
細胞特性：
1）細胞來源于實驗動物正常肝臟組織。
2)細胞鑒定：Vimentin熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：長梭狀，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 成纖維 細 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介：
肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟對來自體內(nèi)和體外的許多非營養(yǎng)性物質(zhì)如各種、毒物以及體內(nèi)某些代謝產(chǎn)物，具有生物轉(zhuǎn)化作用。通過新陳代謝將它們分解或以原形排出體外。在肝中及外圍有部分結(jié)締組織，這些結(jié)締組織是由成纖維細胞組成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠前白蛋白(PA)elisa檢測試劑盒
小鼠RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)elisa檢測試劑盒
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紅細胞膜蛋白4.2抗體 protein 4.2
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PE-Cy5標記小鼠CD5單克隆抗體 mouse CD5/PE-Cy5
PE標記人CD284 (TLR4)單克隆抗體 human CD284 (TLR4)/PE
神經(jīng)組織特異性F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 Neurabin 1
視網(wǎng)膜色素變性蛋白26抗體 CERKL
ENTPD4蛋白抗體 ENTPD4
FAM21C蛋白抗體 FAM21C
磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 phospho-Aconitase 1 (Ser138)
磷酸化真核翻譯起始因子4E重組兔單克隆抗體 phospho-eIF4E (Ser209)
促進成骨細胞分化因子/GDPD2抗體 GDE3
蛋白S抗體 Protein S
鋅指蛋白437抗體 ZBTB2
嗅覺受體52H1抗體 OR52H1
大鼠細胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)elisa檢測試劑盒
兔肝成纖維細胞HGFA ELISA Kit
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa分析檢測試劑盒
JNK1 + JNK3; JNK1 + 3; JNK1+JNK3; JNK1/3; c Jun N terminal kinase 1; JNK1; JNK3; JAK 1A; JAK1A; JNK 1; JNK 46; JNK; JNK1A2; JNK21B1/2; MAPK 8; MAPK8; Mitogen activated protein kinase 8; PRKM 8; PRKM8; Protein kinase JNK1; SAPK 1; SAPK gamma; SAPK1; c-Jun; Stress activated protein kinase JNK1; Tyrosine protein kinase JAK1; MK08_HUMAN.
兔肝成纖維細胞
人肺成纖維細胞
SNU-398人肝癌細胞
RSC96大鼠雪旺細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。