
細(xì)胞簡介:

結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸,在第 3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部,大部分固定于腹后壁,結(jié)腸的排列酷似英文字母M,將小腸包圍在內(nèi)。神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長突起,由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
結(jié)腸組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X2065 |
僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于實驗動物正常結(jié)腸組織。
2)細(xì)胞鑒定:NSE熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 神經(jīng)元 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細(xì)胞傳代:當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進(jìn)行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞,消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況,一旦達(dá)到消化完成(皺縮細(xì)胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機(jī)械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
VMAELISAKit
植物吲哚乙酸(IAA)elisa分析檢測試劑盒
IAA ELISA Kit
人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)elisa分析檢測試劑盒
HumanPIPELISAKit
大鼠PGES基因甲基化檢測試劑盒
人26S蛋白酶體非ATP酶調(diào)節(jié)亞基11(PSMD11)elisa分析檢測試劑盒
大鼠B-細(xì)胞趨化因子1(BLC1)elisa檢測試劑盒
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)elisa檢測試劑盒
KDEL受體抗體
KDEL Receptor
芳香基硫酸酯酶K抗體
ARSK
人催產(chǎn)素受體(OXTR)elisa分析檢測試劑盒
腸E(Staphylococcus aureus : enterotoxin E)鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
小鼠足盂蛋白(PCX)elisa檢測試劑盒
大鼠脯氨酰羧肽酶(PRCP)elisa檢測試劑盒
核糖體蛋白L23A抗體
RPL23A
嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體
Chimaerin 2
突觸樣蛋白5亞型2抗體 Anti-SYTL5/slp5
朊蛋白CD230抗體 Anti-Prion protein PrP/CD230
磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶A抗體 Anti-PCYT1A
人狀瘤E6相關(guān)蛋白抗體 Anti-UBE3A/E6-AP
膠體金標(biāo)記的羊抗人IgM
兔結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞Rabbit Anti-Dog IgG H&L whole serum
鋅指蛋白784抗體
CRP 2; CRP2; CSRP2; CSRP2_HUMAN; Cysteine and glycine rich protein 2; Cysteine and glycine-rich protein 2; Cysteine rich protein 2; Cysteine-rich protein 2; LIM domain only 5 smooth muscle; LIM domain only protein 5; LMO 5; LMO-5; LMO5; SmLIM; Smooth muscle cell LIM protein.
兔結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞
人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞
C8166人白血病細(xì)胞
SK-BR-3人乳腺癌細(xì)胞