
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔小腸成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
小腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭狀細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2054
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常小腸組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 成纖維 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連。小腸與心互為表里。是食物消化吸收的主要場所,盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,全長約 5-6米,張開有半個籃球大,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。其管壁外圍有結(jié)締組織,這些結(jié)締組織由成纖維細(xì)胞構(gòu)成,對小腸起到支持和保護(hù)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa分析檢測試劑盒
LSM14A蛋白抗體
LSM14A/C19orf13
細(xì)胞色素P450 2W1抗體
CYP2W1
冰凍切片過氧化酶活性(混合型)染色試劑盒
人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa檢測試劑盒
大鼠補體C5a(C5a)elisa檢測試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)elisa檢測試劑盒
ORC5L蛋白抗體
ORC5L
鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內(nèi)含蛋白1A抗體
HDHD1A
金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) Anti-TIMP-1(NT)
血小板源性生長因子受體A抗體(PDGFRα) Anti-PDGFRA
磷酸化酶β抗體 Anti-PHKB
溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體 Anti-Slc22a5
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體
phospho-ICK (Tyr159)
嗅覺受體5T3抗體
OR5T3
鋅指蛋白340抗體 Anti-ZBTB46/ZNF340/BTBD4
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B抗體 Anti-NAT8B
環(huán)指蛋白133抗體 Anti-RNF133
L選擇素抗體 Anti-L-Selectin/CD62L
大鼠P物質(zhì)(SP)elisa分析檢測試劑盒
兔小腸成纖維細(xì)胞細(xì)胞胰腺脂酶活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠血小板反應(yīng)蛋白3(THBS3)elisa檢測試劑盒
HERV-W_7q21.2 provirus ancestral Env polyprotein; Endogenous retrovirus group W member 1; env; Env-W; Envelope polyprotein gPr73; Enverin; ENW1_HUMAN; ERVW; ERVW-1; Gp24; Gp50; HERV-7q Envelope protein; HERV-W envelope protein; HERVW; SU; Syncytin 1; Syncytin; Syncytin-1; TM; Transmembrane protein; Surface protein.
兔小腸成纖維細(xì)胞
大鼠心室心肌細(xì)胞
小鼠神經(jīng)元細(xì)胞;NSC34
TCCSUP人膀胱癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。