培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
脂肪組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2151
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常脂肪組織。
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 內(nèi)皮 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管等多種和綜合癥發(fā)展的病理基礎(chǔ)。一旦微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常的生物學(xué)功能，引起多種的發(fā)生。
微血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系。微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì)，來維持血管的正常狀態(tài)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)elisa檢測試劑盒
大鼠泛素激活酶(E1/UBAE)elisa檢測試劑盒
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa檢測試劑盒
人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)elisa檢測試劑盒
血液硝酸鹽含量熒光定量檢測試劑盒
細(xì)胞結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性熒光定量檢測試劑盒
人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa檢測試劑盒
小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)elisa檢測試劑盒
嗅覺受體52E5抗體 OR52E5
血紅素氧合酶2抗體 HO-2
蛋白激酶C zeta 抗體 PKC zeta
蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B抗體 PPP2R1B
FAM5B蛋白抗體 FAM5B
FITC標(biāo)記人CD106單克隆抗體 human CD106/FITC
磷酸化周期素D3抗體 phospho-Cyclin D3 (Thr283)
磷酯酶Cγ1重組兔單克隆抗體 PLCG1
20號染色體開放閱讀框107抗體 C20orf107
3號染色體開放閱讀框54抗體 C3orf54
肌球蛋白3抗體 Myosin-3
激活激酶PAK7抗體 PAK5
PRDM1單克隆抗體 PRDM1
ras癌基因蛋白1抗體 RSU1
絲氨酸/蘇氨酸SRP40抗體 SFRS5
羧肽酶A2抗體 Carboxypeptidase A2
組織甘肽（GLUTATHIONE）總濃度熒光定量檢測試劑盒
兔脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy5.5
細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體
bHLHa39; Class A basic helix-loop-helix protein 39; Dermis expressed protein 1; Dermis-expressed protein 1; DERMO 1; Dermo-1; DERMO1; MGC117334; Twist 2; Twist homolog 2 (Drosophila); Twist homolog 2; Twist related bHLH protein Dermo1; Twist related protein 2; Twist-related protein 2; Twist2; TWST2_HUMAN.
兔脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠胃黏膜成纖維細(xì)胞
RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞
U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。