
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
主動(dòng)脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2036
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)或血管假性血友病 因子(vWF)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 內(nèi)皮 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下,分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究內(nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理,動(dòng)脈粥樣化等的發(fā)病機(jī)理以及發(fā)展新的方法。
公司正在出售的產(chǎn)品:
二胺氧化酶測試盒
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)elisa檢測試劑盒
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒100ml
人鈣衛(wèi)蛋白elisa分析檢測試劑盒
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞篩選試劑盒
體液賴羥化酶(lysyl hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒
人補(bǔ)體片斷4b(C4b)elisa檢測試劑盒
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小鼠載脂蛋白E(Apo-E)elisa檢測試劑盒
乙酰化化組蛋白H2B (Lys20)鼠單克隆抗體 Histone H2B (Acetyl K20)
疣狀表皮發(fā)育蛋白1抗體 TMC6
二肽基肽酶10抗體 DPP10
防御素β-108B/β-defensin 108B抗體 DEFB108B
GRPEL2蛋白抗體 GRPEL2
G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 GPR24
囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Use1抗體 USE1
能量平衡相關(guān)蛋白抗體 Adropin
AF488標(biāo)記的網(wǎng)格蛋白重鏈抗體 Clathrin heavy chain, Alexa Fluor 488 conjugated
AF680標(biāo)記的周期素依賴性激酶2抗體 CDK2, Alexa Fluor 680 conjugated
膠原樣蛋白抗體 COL20A1
精氨酸脫羧酶抗體 ODCp
SET結(jié)合蛋白1抗體 SETBP1
Symplekin蛋白抗體 Symplekin
源盒蛋白HOXB13抗體 HOXB13
微管相關(guān)源蛋白TPX2抗體 TPX2
組織MEK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
兔主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞Rat F-actin ELISA Kit
人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒
exo1; EXO1_HUMAN; ExoI; Exonuclease 1; Exonuclease I; Exonuclease1; HEX1; hExo I; hExo1; hExoI; Rad2 nuclease family member homolog of S. cerevisiae exonuclease 1.
兔主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
ARIP 大鼠胰腺腫瘤細(xì)胞
U251 MG/TMZ人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。