細(xì)胞簡(jiǎn)介：
自然殺傷細(xì)胞 (natural killer cell，NK)是機(jī)體重要的細(xì)胞，不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和調(diào)節(jié)有關(guān)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身性的發(fā)生。一種穩(wěn)定表達(dá)在NK和LAK細(xì)胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK細(xì)胞在IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性，而HNK-1(CD57）和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
自然殺傷細(xì)胞刺激因子（ natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 對(duì)NK細(xì)胞有刺激作???
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號(hào) |
用途 |
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外周血組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1932 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠的正常外周血組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD56或CD16熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：圓形或橢圓形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代NK細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動(dòng)物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡(jiǎn)單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺(tái)使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時(shí)能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個(gè)無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時(shí)，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個(gè)細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個(gè)細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時(shí)可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時(shí)間根據(jù)正常細(xì)胞消化時(shí)間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個(gè)細(xì)胞時(shí)候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會(huì)再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時(shí)候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織對(duì)氧磷酶3（PON3）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
KIAA1191蛋白抗體
KIAA1191
軟骨蛋白樣蛋白抗體
CHADL
組織BLK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
人次黃嘌呤氧化酶elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠重肽鐵蛋白(FTH)elisa檢測(cè)試劑盒
乙酰轉(zhuǎn)移酶13抗體
NAT13
口蹄疫病毒3ABC抗體
FMDV 3ABC
瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白6抗體（M亞家族） Anti-TRPM6
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 Anti-phospho-PKC delta (Ser645)
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白190抗體(N端) Anti-Oct-4B(OCT4B-190)NT
干燥癥SSB/La抗體 Anti-SSB/La
紅細(xì)胞分化相關(guān)基因蛋白抗體
Hemo
神經(jīng)肽G蛋白偶聯(lián)受體抗體
NPFF2
極低密度脂蛋白受體抗體 Anti-VLDL Receptor
富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 Anti-NALP6
血管**素核糖核酸酶4抗體(肌性側(cè)索硬化癥蛋白) Anti-RNASE4/Angiogenin
TWIST蛋白2抗體抗體 Anti-Twist2
大鼠雌二醇受體(ER)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠NK細(xì)胞Human IgG / RBITC
G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體
29 kDa calbindin; CAB 29; CAB29; CAL 2; CAL2; CALB 2; CALB2; Calbindin 2 29kDa; Calbindin 2; Calbindin D29K; Calbindin2; CR; CALB2_HUMAN; Calretinin.
小鼠NK細(xì)胞
大鼠輸卵管平滑肌細(xì)胞
大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞；9L/lacZ
UMR-106大鼠骨肉瘤細(xì)胞