
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1822
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腸組織。
2) 細(xì)胞鑒定:c-kit熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
Cajal間質(zhì)細(xì)胞以網(wǎng)絡(luò)狀分布在消化道腸神經(jīng)系統(tǒng)末梢與平滑肌細(xì)胞之間的一類特殊細(xì)胞。胃腸道運(yùn)動(dòng)功能的產(chǎn)生和維持是Cajal間質(zhì)細(xì)胞、腸神經(jīng)系統(tǒng)以及平滑肌細(xì)胞三者協(xié)同作用的結(jié)果。間質(zhì)細(xì)胞不僅能自發(fā)產(chǎn)生節(jié)律性慢波,而且能介導(dǎo)腸神經(jīng)系統(tǒng)與平滑肌間的信號調(diào)節(jié)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠促甲狀腺(TSH)elisa檢測試劑盒
組織甲基化組蛋白H3-K4染色質(zhì)沉淀分析(CHIP)試劑盒
小鼠表皮生長因子(EGF)elisa分析檢測試劑盒
鵝鈣結(jié)合蛋白(CR)elisa分析檢測試劑盒
非位素HRP-DAB顯色法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒
細(xì)胞甘油-3-磷酸脫氫酶-1(Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-1)活性光譜法定量檢測試劑盒
人膽固醇7α-羥化酶(CYP7A)elisa檢測試劑盒
大鼠兒茶酚抑素elisa分析檢測試劑盒
植物可溶性糖含量測試盒
Caspase抑制劑COP蛋白抗體 CARD16
CD98重鏈抗原抗體 CD98
細(xì)胞相關(guān)AF4樣蛋白抗體 AFF4
磷酸化KB抑制蛋白激酶ε phospho-IKB epsilon (Ser157)
癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子21抗體 CEACAM21
白細(xì)胞介素18結(jié)合蛋白抗體 IL18BP
細(xì)胞外基質(zhì)蛋白2抗體 SPARCL1
纖維素酶抗體 Cellulase
MED28蛋白抗體 MED28
NADPH氧化酶2抗體 NOX2
溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移酶1抗體 LPCAT1
乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體 RAD51C/TDRD1
谷氨酰胺6-磷酸果糖轉(zhuǎn)移酶抗體 GFPT1
過量位點(diǎn)蛋白4抗體 SURF4
質(zhì)子梯度調(diào)節(jié)蛋白1抗體 UQCRFS1
豬細(xì)小病毒VP2抗體 PPV VP2
組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量檢測試劑盒(羥自由基)
小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞小鼠肝素酶(HPA)elisa檢測試劑盒
雞環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒
cadherin10; cadherin-10; Cadherin 10 (T2 cadherin); Cadherin 10 type 2 (T2 cadherin); Cadherin 10 type 2; Cadherin10; T2 cadherin; CAD10_HUMAN.
小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
大鼠腹水癌細(xì)胞;LLC-WRC256
VERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。