產(chǎn)品名稱
小鼠腸粘膜上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腸道組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
上皮樣細胞，
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1831
用途
僅供科研實驗
細胞特性：
1）來源：腸道組織
2）含量：>5x105 個/mL
3）鑒定：角蛋白(PCK)熒光染色法
4）純度：>85%
5）污染：支原體、、酵母和檢測為陰性
6）規(guī)格：1mL凍存管包裝
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介：
腸指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。
腸壁結構一般分4層，由外向內依次為：漿膜層，平滑肌層，粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層：靠近粘膜下層的是一層平滑肌，稱為粘膜肌層。其次為結締組織，又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構成的粘膜。小腸粘膜有縱行和橫行皺襞，并有無數(shù)細小的指狀突起，稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內陷成管狀，稱為利貝屈恩氏隱窩。
隱窩基底部的上皮細胞不斷地進行有絲分裂，產(chǎn)生新細胞。隱窩上皮中還有許多杯狀細胞，它分耀??
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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CATX 8; CATX-8; CATX8; member RAS oncogene family; RAB25; RAB-25; RAB25_HUMAN; Ras related protein Rab 25; Ras-related protein Rab-25.
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其它
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