培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
主動(dòng)脈組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭形細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1785
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常主動(dòng)脈組織。
2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
腹腔主動(dòng)脈是人體的大動(dòng)脈，直接延續(xù)于發(fā)自左心室的主動(dòng)脈，胸腔主動(dòng)脈，沿脊柱左側(cè)下行，主要負(fù)責(zé)腹腔臟器和腹壁的血液供應(yīng)。主動(dòng)脈是由內(nèi)膜、中層彈力層和外膜構(gòu)成，三層緊密貼合在一起。
其中，外膜是專門的支持組織，外膜成纖維是外膜的主要成分，在血管炎癥反應(yīng)、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠糖原合成酶激酶(GSK)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠半乳凝素8(GAL8)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠羧肽酶A3(CPA3)elisa檢測(cè)試劑盒
人T細(xì)胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒
鈣調(diào)蛋白結(jié)合檢測(cè)試劑盒篩選
組織血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶（ACE）總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
人二胺氧化酶(DAO)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa檢測(cè)試劑盒
魚促甲狀腺素(TSH)elisa檢測(cè)試劑盒
溶質(zhì)載體家族17成員3抗體 SLC17A3
乳腺癌易感基因1相互作用蛋白1抗體 MRPL36
KLHL1蛋白抗體 KLHL1
MAN1C1蛋白抗體 MAN1C1
中介素抗體 ADM2
腫瘤異常甲基化蛋白2抗體 HIC2
干擾素α11抗體 Interferon alpha 11
構(gòu)成激活過(guò)氧化酶活化受體γ樣蛋白2抗體 FAM120C
纖維蛋白原γ鏈抗體 Fibrinogen gamma chain
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位酶8A/耳聾/肌張力障礙肽抗體 TIMM8A
γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抗體 ABAT
白介素-17E抗體 IL17E
BOLA2蛋白抗體 BOLA2
CD361抗體 CD361
離子通道蛋白Kv3.1抗體 KCNC1
磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 Phospho-PERK (Thr980)
胱抑制劑（Cystatin C）定量檢測(cè)試劑盒
小鼠腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Human IgM / PE-Cy5.5
PRRC2C蛋白抗體
MEG; Protein tyrosine phosphatase MEG1; PTN4; PTPase MEG1; PTPN4; Tyrosine protein phosphatase non receptor type 4; PTN4_HUMAN.
小鼠腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞
大鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞
人
Y79人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。